靶向ev71+vp1基因sirna真核表达质粒的构建与筛选的研究

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1、重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：吕叁叁日期：2殳f2：圭：!墨。．_．学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医

2、科大学．本人保证毕业高校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文．论文作者签名：指导教师签名：．重壅垦翌奎兰堡圭堡壅生兰篁笙茎——_--——____—__-————————————_——__—————————————————————————————————一一一英文缩写英文全称AmpAPSbpBSACFUcDNA℃C02ddH20dIH20DMSOdsRNAdNTPE．coliEDTAEG

3、FPEPFBSgGly符号说明ampicillinammoniumpersulfatebasepairbovineserumalbumincolonyformingunitcomplementaryDNAcenti-degreecarbondioxidedoubledistilledwaterion—deletedwaterDimethylSulfoxidedoublestrandedRNAdeoxyribonucleosidetriphosphateEscherichiacoliethylenediaminetetra-aceticacidenhancergreenfl

4、uorescentproteineppendorffetalbovineserumgramGiycin1中文名称氨苄青霉素过硫酸铵碱基对牛血清白蛋白茵落形成单位互补DNA摄氏度二氧化碳双蒸水去离子水二甲基亚砜双链RNA脱氧核糖三磷酸大肠杆菌乙二胺四乙酸增强型绿色荧光蛋白微量离心管胎牛血清克甘氨酸重庆医科大学硕士研究生学位论文hHClHRPKbKDalLALBL．JMMtbmlnhourhydrochloricacidhorseradishperoxidasekilobasepairkiiodaoltonliter小时盐酸辣根过氧化物酶千碱基对千道尔顿升LBmediumco

5、ntainingampicillin含氨卞青霉素LB培养基Lria．-bertainMediumL6wenstein-jensenMediummoleMycobacteriumtuberculosisminute。mM．mmolmillimolemlMinmI酬APBSPBSTPCRPHPTGSPHRNAmilliliterminutemessengerRNALB培养基改良罗氏培养基摩尔结核分枝杆菌分钟’毫摩尔毫升分钟信使RNAphosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液phosphatebufferedsolutionpolymerasechainre

6、actionpotentialofhydrogenposttranscriptiongenesilencingpotentialofhydrogenribonucleicacid2磷酸盐吐温缓冲液(含0．05％Tween．20)聚合酶链反应酸碱度转录后基因沉默酸碱度核糖核酸重庆医科大学硕士研究生学位论文RT-PCRreverseIranscriptionPCR逆转录PCRRNAiSeCsiRNAs删ATETEMEDTris“lpgURNAinterferencesecondsmallinterfereneRNARNA干扰秒钟小干扰RNAshorthairpinRNA短发夹

7、RNATris．EDTA三羟甲基氨基甲烷一乙二胺四乙酸N，N,N，N，tetramethyl．ethylenediamineN,N,N,N，四甲基乙二胺trihydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷microlitermicrogramunit3微升微克单位重庆医科大学硕士研究生学位论文靶向EV71VPl基因siRNA真核表达质粒的构建及筛选研究摘要目的：构建和筛选靶向EV71病毒VPl基因的高效siRNA表达载体；将筛选出的高效siRNA重组到减毒沙门氏菌中，构建以减毒沙门氏菌为载体、靶向EV71病