dads对sw480细胞系生物学行为及蛋白质表达谱的影响

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1、苏坚南华大学硕士学位论文主要英文缩略语索引DADSdiallyldisulfide二烯丙基二硫MALDI-TOMatrix-assisted基质辅助激光解吸飞F-MSlaser-desorption/ionizationtime-of-flight行时间质谱massspectrometryPMFpeptidemassfingerprint肽质量指纹图IRinhibitionratio抑制率PBSphosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠DTT1,4-dithiothreitol1,4-二硫代苏糖醇BS

2、Abovineserumalbumin牛血清白蛋白ACNAcetonitrile乙腈APSammoniumpersulfate过硫酸胺BisN,N′-Methylene-bis-(acrylamide)甲叉双丙烯酰胺CCAα-cyano-4-hydoxycinnamicacidα-氰基-4-羟基肉桂酸CHAPS3-((3-cholamidopropyl)dimethylammonio)-3-[（胆酰胺丙基）-1-propanesulfonate)二乙胺]-丙磺酸ddH2Odoubledistilledwater双蒸水2-DEtwo-dimensionalelectrophor

3、esis双向电泳EDTAethylenediaminetetraaceticacid,editic乙二胺四乙酸acidIAAiodoacetamide碘乙酰胺IPGimmobilizedpHgradient固相pH梯度PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳1原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的

4、贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：年月日关于学位论文使用授权说明本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。作者签名：导师签名：日期：年月日苏坚南华大学硕士学位论文中文摘要第一部分DADS对人结肠癌SW480细胞系生物学行为的影响研究生：苏坚导师：贺修胜教授目的：探讨二烯丙基二硫（diallyldisulfide，DADS）对人结肠癌细胞系（SW480）生物学行为的影响及其机制。方法

5、：以SW480细胞系为实验研究对象,通过MTT法测定DADS对SW480细胞的生长抑制效应,采用HE染色及流式细胞仪检测药物作用前后细胞形态学及细胞周期分布等方面的改变。结果：MTT法测定结果显示，DADS对SW480细胞具有明显的生长抑制作用，DADS浓度由30μg/ml增加至70μg/ml时，SW480细胞的生长抑制率由23%提高到66%，呈剂量-效应依赖关系（p<0.05）；形态学观察发现DADS诱导SW480细胞呈现出异型性降低，核质比下降等细胞成熟分化的特征；表明SW480细胞在DADS作用后，使瘤细胞异型性下降，并使部分瘤细胞向成熟细胞方向分化。流式细胞仪检测结果

6、显示：随着DADS处理浓度加大，瘤细胞群体中S期细胞数减少，细胞阻滞在G2/M期的细胞数目增多，亚二倍体峰逐渐增高。结论：⑴DADS对SW480细胞系具有明显的增殖抑制作用，且呈现剂量-效应依赖关系。⑵DADS使SW480细胞阻滞在G2/M期。关键词：DADS；SW480；生长抑制；细胞周期3苏坚南华大学硕士学位论文第二部分DADS对人结肠癌SW480细胞系蛋白质表达谱的影响目的：近年来，蛋白质组学技术已广泛应用于肿瘤研究领域，但用于结肠癌的研究较少报导。本课题旨在研究DADS抑制SW480细胞系生长，探讨DADS诱导人结肠癌SW480细胞蛋白质组差异表达的相关分子机制。方法

7、：采用蛋白质组学相关技术，如二维电泳、图像分析、质谱技术等方法，观察DADS对SW480细胞系的生长抑制以及蛋白质组的差异表达。用固相pH梯度双向凝胶电泳，分离SW480细胞和DADS处理的SW480细胞总蛋白质；用银染和考马斯亮蓝染色对凝胶上的蛋白质进行可视化检测；经过染色后的凝胶用PDQuest软件进行分析，切取部分重复性好、边界清晰的差异蛋白质点经胶内原位酶解，用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）测定肽质量指纹图（PMF），将所得的数据进行生物信息学分析处理。结果：在相同