氧化应激在高糖诱导成骨细胞凋亡中的作用

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1、氧化应激在高糖诱导成骨细胞凋亡中的作用王小菊1冯正平*1李济伶1陈力学2汤为学2(1.重庆医科大学附属第一医院内分泌科;2.重庆医科大学附属第一医院实验研究中心;400016,重庆,中国)【摘要】目的:探讨氧化应激在高糖诱导成骨细胞凋亡中的作用。方法:体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组、NAC组、11.0mmol/L高糖组、11.0mmol/L高糖+NAC组、22.0mmol/L高糖组、22.0mmol/L高糖+NAC组。应用AnnexinV-FITC/PI处理不同组别细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;Honchest33258染色观察细胞核形

2、态;采用MTT法检测细胞增殖;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞ROS的生成。结果:1)11.0mmol/L高糖组较正常对照组MC3T3-E1细胞凋亡率增加,但无统计学差异(P﹥0.05);22.0mmol/L高糖组较正常对照组和11.0mmol/L高糖组MC3T3-E1细胞凋亡率显著增加(P﹤0.01)。2)11.0mmol/L高糖组较正常对照组MC3T3-E1细胞增殖轻微下降(P﹥0.05);与正常对照组和11.0mmol/L高糖组相比,22.0mmol/L高糖组MC3T3-E1细胞增殖显著降低(P﹤0.01)。3)高糖组MC3T3-E1细胞胞内

3、ROS水平显著增加(P﹤0.05),但无明显浓度依赖性,抗氧化剂NAC可显著降低ROS水平(P﹤0.05),改善高糖所致的凋亡增加和增殖下降(P﹤0.05)。结论:高糖可通过增加成骨细胞胞内ROS生成引起MC3T3-E1成骨细胞凋亡增加、增殖下降。【关键词】氧化应激;ROS;凋亡;增殖FunctionofoxidativestressinapoptosisofosteoblastinducedbyhighglucoseWANGXiaoju1,FENGZhengping1,LIJiling1,CHENLixue2,TANGWeixue2(1.Depar

4、tmentofEndocrinology,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,China,400016;2.CentralLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,China,400016.)【Abstract】Objective:Toinvestigatethefunctionofoxidativestressinapoptosisandproli

5、ferationofMC3T3-E1cellsunderhighglucose.Methods:MC3T3-E1cellsculturedinvitroweredividedintonormalcontrolgroup,NACgroup,11.0mmol/Lhigh-glucosegroup,11.0mmol/Lhigh-glucose+NACgroup,22.0mmol/Lhigh-glucosegroupand22.0mmol/Lhigh-glucose+NACgroup.ROSproductionwasmeasuredwithDCFH-DAfl

6、uorescentprobe.CellproliferationwasmeasuredbyMTTanalysis.CellsindifferentgroupswerestainedwithAnnexinV-FITC/PI,thentheapoptosisrateweredetectedbyFlowCytometry.MorphologyofcellnucleuswasobservedwithHonchest33258.Results:1)Cellapoptosisof11.0mmol/Lhigh-glucoseincreasescomparingto

7、normalcontrolgroup,butthereisnosignificance(P﹥0.05);Cellapoptosisin22.0mmol/Lhigh-glucosegroupincreasessignificantlycomparingtonormalcontrolgroupand11.0mmol/Lhigh-glucosegroup(P﹤0.01).2)ODvaluesin11.0mmol/Lhigh-glucoseslightlydecreases(P﹥0.05).Comparingwithnormalcontroland11.0m

8、mol/Lhigh-glucosegroup,ODvaluesin22.0mmol/Lhigh-glucos

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