高效液相色谱法测定雷公藤片含量的方法研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果高效液相色谱法测定雷公藤片含量的方法研究【摘要】目的提高雷公藤片的质量标准，摸索高效液相色谱法测定雷公藤片含量的方法。方法采用高效液相色谱法，C18柱，流动相为甲醇-水，检测波长21nm。结果雷公藤甲素线性范围为～μg，r=，平均回收率为%，RSD为%。结论雷公藤片含量测定限度暂定为：每片含雷公藤以雷公藤甲素计，不得少于mg/片。【关键词】雷公藤片雷公藤甲素高效液相色谱雷公藤片为卫矛科木质

2、藤本植物雷公藤Tripterygiumwilfordii，药材经醋酸乙酯提取后制成的片剂，原卫生部药品标准采用薄层扫描法［1］测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量，因雷公藤药材中成分较为复杂，采用薄层法难以得到较好的分离效果，且其展开显色后极不稳定，显色剂褪色较快，难以得到较好的测定结果。为了有效地控制其质量，国家药品标准行动计划组下达了提高雷公藤片质量标准的任务。通过实验研究，本文建立了HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量，经研究其中雷公藤甲素在所选用条件下分离较好，检测灵敏度高，测定专属性强，可以作为本品的含量测定控制

3、方法。　　1仪器与试药课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果　　HP-1100型高效液相色谱仪；大连依利特HypersilC18液相色谱柱；雷公藤甲素对照品；甲醇为色谱纯，水为重蒸水；其他试剂为分析纯；雷公藤片由湖北三九黄石药业有限公司提供。　　2方法与结果.1色谱条件色谱柱为大连依利特HypersilC18液相色谱

4、柱；甲醇-水为流动相；检测波长21nm；流速1ml/min；柱温：35℃；理论板数按雷公藤甲素峰计不低于000。.2供试液制备方法和洗脱液用量的选择.供试液制备方法的选择雷公藤制剂中成分较为复杂，不经提取精制难以得到较好的分离效果，参照常雪灵等［2］的文献报道，进行了提取精制方法的考察。精密称取样品粉末约1g，加醋酸乙酯20ml，超声使溶解，加5%HCl溶液1ml洗涤两次，弃去酸液，醋酸乙酯液加10%NaOH溶液20ml，水浴加热1min，分取碱液，并用10%NaOH溶液20ml萃取两次，合并碱液，加稀HCl调pH至4，

5、以醋酸乙酯20ml萃取3次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml作为供试品溶液。精密称取样品粉末约1g，加氯仿10ml，超声10min，加中性氧化铝1g，搅拌均匀，蒸干，上中性氧化铝柱，以醋酸乙酯溶液洗脱，收集洗脱液150课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10

6、ml作为供试品溶液。精密称取样品粉末约1g，加氯仿10ml，超声10min，加中性氧化铝1g，搅拌均匀，蒸干，上中性氧化铝柱，以10%醋酸乙酯石油醚50ml洗脱，再以1%乙醇醋酸乙酯溶液洗脱，收集洗脱液100ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml作为供试品溶液。取上述3种溶液按拟定的色谱条件分别进样。结果见表1。表1种提取分离方法测定结果结果表明：采用上中性氧化铝柱提取分离效果较萃取法好，方法3中用10%醋酸乙酯石油醚50ml洗脱主要是除去杂质，但经比较此法对分离影响不大，而以1%乙醇醋酸乙酯溶液洗脱对测定结果无多

7、大影响，但洗下较多杂质，基线波动较大，杂质峰较多，对分离造成一定影响，故采用方法2作为含量测定方法。.溶剂用量的选择精密称取样品粉末约1g，共3份，分别加氯仿10ml，超声10min，加中性氧化铝1g，搅拌均匀，蒸干，上中性氧化铝柱，以醋酸乙酯溶液洗脱，分别收集洗脱液100，150，200ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定容至10ml作为供试品溶液。将3种溶液按拟定的色谱条件分别进样。结果见表2。表2种溶剂用量测定结果结果表明，以醋酸乙酯溶液洗脱，收集洗脱液150课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能

8、在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果ml较合适。.流动相的选择以乙腈-水作为流动相进行试验，结果雷公藤甲素出峰较快，样品溶液难以得到较好分离，改用，，等雷公藤甲素均不出