临床医学毕业论文不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

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1、不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响姓名，2014年6月25日不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响作者：庞金辉，黄煌渊，张权，纪斌，曹成福【摘要】目的观察不同浓度地塞米松对体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨分化、增殖能力及凋亡率的影响。方法以梯度密度分离法获取人骨髓间充质干细胞进行体外培养，以1x10-9、1x10-8、1x10-7、1x10-6mol/L4种不同浓度地塞米松分别处理细胞。检测各组细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性；RTPCR法检测骨桥蛋0(OPN)基因的表达；冈甲基偶氮唑蓝(MTT

2、)比色法测定各组细胞的增殖率；流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果低浓度(lxlO-9mol/L)地塞米松对ALP的表达无显著作用(P0.05)，而lxl0-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明敁增加ALP的活性(P0.01);所有实验组的hMSCs均有OPNmRNA表达，其表达强度随着地塞米松浓度增加而增强；lxlO-9mol/L地塞米松对细胞增殖无明显影响(P0.05),lxl0-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖(P0.01);体外培养的hMSCs凋亡率随地塞米松浓度的增加而升高(P0.01)。结论lxl0-8mol/

3、L及以上浓度的地塞米松可显著增强hMSCs成骨分化能力，同吋抑制细胞增殖并促进其凋亡。【关键词】间充质干细胞；地塞米松；碱性磷酸酶；骨桥蛋0;细胞增殖；凋亡Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofdexamethasoneonthebiologicalcharacteristicsofhumanmesenchymalstemcells(hMSCs)derivedfrombonemarrowinvitro.MethodsTheprimaryhMSCswereisolatedandculturedinvi

4、tro.Insubcultures,hMSCswererespectivelytreatedwithfourdifferentconcentrationsofdexamethasone(1x10-9,1x10-8,1x10-7andl><10-6mol/L).Thealkalinephosphatase(ALP)activitywasmeasured；mRNAofosteopontinwasobservedbyreversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR);theproliferat

5、ionofhMSCswasevaluatedbyMTTassay；apoptosiswasexaminedwithflowcytometer.ResultsTreatmentofcellswithhighconcentrationofdexamethasone(lx10-8Jx10-7andl><10-6mol/L)for8daysledtoasignificantincreaseinALPactivity(PO.Ol).TheosteopontinmRNAwasinducedbydifferentconcentrationofdexa

6、methasonerespectively.TheopticaldensityvalueofhMSCstreatedwithhighconcentrationofdexamethasonefor6dayswassignificantlylowerthanthatofthecontrols(PO.Ol)-DexamethasoneincreasedtheapoptosisrateofallhMSCsculturedinvitro.ConclusionThehighconcentrationofdexamethasone(1x10-8,1x

7、10-7andlxl0-6mol/L)inducesthedifferentiationofhMSCstoosteoblasticcclls，inhibitstheproliferationofcellsandleadstoanincreaseofitsapoptosisrate.Keywords:mesenchymalstemcells；dexamethasone；alkalinephosphatase；osteopontin；cellproliferation；apoptosis货髓间充质干细胞（humanmesenchymalst

8、emcells,hMSCs）是近年来毋组织工程和干细胞研究的热点种子细胞之一。目前已知，地塞米松可以诱导骨髓间充质干细胞h'd成骨细胞方h'd分化，但是地寒米松对骨髓间充质干细胞影响的系统性研究较为鲜见。木