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《不同浓度羊自体血清对骨髓间充质干细胞增殖能力影响的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、不同浓度羊自体血清对骨髓间充质干细胞增殖能力影响的实验研究张颖,杨柳,段小军,王富友(第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆400038)摘要:目的观察不同浓度羊自体血清对骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs)增殖活力的影响,并筛选出最佳血清培养浓度。方法以12月龄青山羊为实验动物,首先制备自体血清,分离获取BMSCs;然后选DMEM/F12为基础培养基,采用不同体积分数(分别为5%、10%、15%)自体血清及10%体积分数胎牛血
2、清培养基分别对BMSCs进行培养;通过显微镜下细胞形态学观察、活细胞计数及MTT等方法对细胞进行检测,并对检测数据做统计学分析。结果不同浓度自体血清培养培养条件下BMSCs形态正常。与10%胎牛血清组进行比较,5%自体血清组BMSCs增殖较慢(P<0.05),10%、15%自体血清组增殖较好,但组间无统计学差异(P>0.05)。结论羊自体血清培养BMSCs是可行的,10%浓度自体血清是最佳培养浓度。关键词:骨髓间充质干细胞;自体血清;MTT法.中图法分类号:文献标识码:Studyoneffectof
3、differentconcentrationsofgoatautologousserumintheproliferationofBMSCsZHANGYing,YANGLiu,DUANXiao-jun,WANGFu-you(CentreforJointSurgery,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongaing,400038,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofdiffe
4、rrentconcentrationofgoatautologousserumintheproliferationofBMSCs,andsieveouttheoptimizedone.MethodsTouse12months-oldgoatasexperimentalanimal,preparetheautologousserumandisolatetheBMSCsfrombonemarrow.ThentheBMSCswereculturedbytheDMEM/F12withdifferentcon
5、centrations(5%,10%,15%)ofautologousserumand10%fetalbovineserum,respectively.ThemorphologyofBMSCs,livingcellscountandMTTvalueswereacquiredintheexperiment.ResultsMorphologyoftheBMSCsinthedifferentgroupsweresimilar.Theproliferationof5%autologousserumgroup
6、wasslowercomparedwiththatof10%fetalbovineserumgroup.(P<0.05).Boththe10%and15%autolousserumgroupshadthesimilarproliferationofBMSCsas10%fetalbovineserumgroup,andhadnosignificantdeviationbetweengroups.(P>0.05).ConclusionCultivationofBMSCswithautologousser
7、umwasavailable.Theoptimizedconcentrationofautologousserumwas10%.Keywords:mesenchymalstemcells;autologousserum;MTT目前,组织工程实验室培养骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs)多采用培养基加异种血清的方法[1],例如胎牛血清(fetalbovineserum,FBS)、新生牛血清(new-borncalfserum,NB
8、CS)等,这些方法以其获取量大、方便、实用广等优势而被采用,然而在组织工基金项目:全军医学科学技术研究“十一五”计划重点课题(06G079);重庆市重点科技攻关项目(CSTC,2007AC5047);西南医院临床创新基金(SWH2006A012)作者简介:张颖,河南省睢县人,博士研究生,主要从事软骨组织工程方面的研究。电话:(023)68766555,E-mail:henry111111@gmail.com通信作者:杨柳,电话:(023)68765280,E-mail