低剂量辐射对骨髓间充质干细胞归巢特性的影响

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3、Df⋯.一A耋acl.ophagec蕊ony—s吐ll撇la6ngM.CSF’f.actc时辩Yhte:婚落洫一¥vLA—BV唧late觚tig眺骨髓骨髓间充质干细胞入胚骀骨髓闻充质于细胞分化群二乙酰羧基荧光素一琥珀酰噩胺酯集落形成单位成纤维细胞磷酸盐缓冲液神经胶质酸性蛋白神经元特异性烯醇化酶肿瘤坏死因子一a臣噬细胞集落刺激因子v-干扰素极迟抗原B亚单位苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本

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6、eUs,MsCs)是骨髓中另一类干细胞,是由骨髓中分离的有黏附贴壁能力的非造血干细胞,可分化成多种成熟的间质细胞,因其呈成纤维细胞样生长,既往被称为成纤维细胞集落形成单位(clonyf0】衄ingunits劢robl硒ts,CFU—F)、骨髓基质成纤维细胞(bonen瑚T0ws仃Dmal舳robl懿ts),1991年Capl觚等将其命名为骨髓间充质干细胞(bonema盯0wmesenchymalstemcdls,BMMSCs)。BMMScs是存在于骨髓基质内的非造血细胞来源的细胞亚群,可以在体外扩增培养,在体外经诱导后可

7、分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱细胞、肌管、神经细胞及基质f11。对于Hsc的增殖、分化起着关键作用【蚴。鉴于间充质干细胞具有易获得、易培养、低免疫原性、能在宿主体内长期存活、易于外源基因转染和长期表达等优点,已作为理想的种子细胞被广泛应用于组织工程、细胞移植、基因治疗及器官移植等领域。1骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定BMMSCs在体内来源广泛,但数量极少,O.1×106.1.0×106个骨髓有核细胞中仅含有1个间充质干细胞,且随着年龄的增加或体质的衰弱,细胞数量逐渐减少,如何分离得到高纯度的骨髓间充质干细胞并

8、在体外大量扩增显得极为重要。目前常用的骨髓间充质干细胞分离方法有:①密度梯度离心法:根据骨髓间充质干细胞与其他细胞的密度不同而采用Percou或Ficoll分离液将其分离出来;②差速贴壁筛选法:应用不同细胞对培养容器介质表面的不同贴壁能力进行细胞分离纯化;③流式细胞仪分选法:根据骨髓间充质干细胞体积小,相对缺少颗粒的特性,利用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行分选;④免疫磁珠法。上述4种分离方法均不能得到高纯度的骨髓间充质干细胞,现在国外较为关注的方法是依据骨髓间充质干细胞对生长因子的反应性不同,通过选择适当的因子刺激增殖

9、从而获得较高比例的骨髓间充质干细胞。同时在国外还建立了一种利用具有3“m孔径的低剂量辐射对骨髓间充质干细胞归巢特性的影响研究背景塑料培养皿从骨髓中筛选骨髓间充质干细胞,这种方法筛选出来的骨髓间充质干细胞均质性大于98%,具有增殖和自我更新的能力,并具有向骨、脂肪、软骨组织分化的潜能。另外,研究证实转基因的骨髓间充质干

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