不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

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1、不同浓度地塞米松对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响作者：庞金辉，黄煌渊，张权，纪斌，曹成福【摘要】目的观察不同浓度地塞米松对体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨分化、增殖能力及凋亡率的影响。方法以梯度密度分离法获取人骨髓间充质干细胞进行体外培养，以1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6mol/L4种不同浓度地塞米松分别处理细胞。检测各组细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性；RTPCR法检测骨桥蛋白(OPN)基因的表达；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定各组细胞的增殖率；流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果低浓度

2、(1×10-9mol/L)地塞米松对ALP的表达无显著作用(P>0.05)，而1×10-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明显增加ALP的活性(P<0.01)；所有实验组的hMSCs均有OPNmRNA表达，其表达强度随着地塞米松浓度增加而增强；1×10-9mol/L地塞米松对细胞增殖无明显影响(P>0.05)，1×10-8mol/L及以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖(P<0.01)；体外培养的hMSCs凋亡率随地塞米松浓度的增加而升高(P<0.01)。结论1×10-8mol/L及以上浓度的地

3、塞米松可显著增强hMSCs成骨分化能力，同时抑制细胞增殖并促进其凋亡。【关键词】间充质干细胞；地塞米松；碱性磷酸酶；骨桥蛋白；细胞增殖；凋亡14Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofdexamethasoneonthebiologicalcharacteristicsofhumanmesenchymalstemcells(hMSCs)derivedfrombonemarrowinvitro.MethodsTheprimaryhMSCswereisolatedandculturedinvit

4、ro．Insubcultures，hMSCswererespectivelytreatedwithfourdifferentconcentrationsofdexamethasone(1×10-9,1×10-8,1×10-7and1×10-6mo1/L)．Thealkalinephosphatase(ALP)activitywasmeasured；mRNAofosteopontinwasobservedbyreversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR);theprolif

5、erationofhMSCswasevaluatedbyMTTassay；apoptosiswasexaminedwithflowcytometer.ResultsTreatmentofcellswithhighconcentrationofdexamethasone(1×10-8,1×10-7and1×10-6mo1/L)for8daysledtoasignificantincreaseinALPactivity(P<0.01)．TheosteopontinmRNAwasinducedbydifferentconcen

6、trationofdexamethasonerespectively．TheopticaldensityvalueofhMSCstreatedwithhighconcentrationofdexamethasonefor6dayswassignificantlylowerthanthatofthecontrols(P<0.01)．DexamethasoneincreasedtheapoptosisrateofallhMSCsculturedinvitro．ConclusionThehighconcentrationofd

7、examethasone(1×10-8,1×10-7and1×10-6mol/L)inducesthedifferentiationofhMSCstoosteoblastic14cells,inhibitstheproliferationofcellsandleadstoanincreaseofitsapoptosisrate．Keywords：mesenchymalstemcells；dexamethasone；alkalinephosphatase；osteopontin；cellproliferation；apoptos

8、is骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)是近年来骨组织工程和干细胞研究的热点种子细胞之一。目前已知，地塞米松可以诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化，但是地塞米松对骨髓间充质干细胞影响的系统性研究较为鲜见。本文探讨不同浓度地塞米