巴西蜂胶最佳提取工艺研究

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1、巴西蜂胶最佳提取工艺研究付梅红,方婧,王祝举,唐力英【摘要】  目的 建立巴西蜂胶最佳提取工艺。方法进行了不同提取溶剂、不同提取时间、不同提取温度、不同料液比、不同提取次数的考察,以总黄酮为检测指标,优选提取工艺。结果最佳提取工艺为:加入蜂胶量40倍的80%乙醇,40℃提取4h,提取两次。结论该提取工艺合理、可行。【关键词】巴西蜂胶;提取工艺;总黄酮  Abstract:ObjectiveTostudytheextractionmethodoftotalflavonoidsinBrazilianpropolis.Methodse,extractiontemperatureandsolve

2、ntquantityonrecoveryrateoftotalflavonoidsperatureofcircumfluenceeofextractionethodisconvenientandfeasible.  Keyg的溶液,即得。  2.1.2供试品溶液的制备  取本品粉末(过三号筛)约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%乙醇10ml,40℃温浸4h,取出,放冷,摇匀,滤过,重复提取1次。合并滤液,精密量取续滤液1ml于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,拌匀,于水浴上挥干溶剂,转入层析柱。先用20ml苯洗,弃去苯液,然后用甲醇洗脱,定容至25ml。摇匀,即得。  2.

3、1.3测定  分别取对照品溶液和供试品溶液,于波长360nm测定吸收值。以芦丁为标准品测定标准曲线,求回归方程,计算供试品中总黄酮含量。  2.2提取工艺的考察  2.2.1线性关系考察精密吸取浓度为0.5mg/ml的芦丁对照品溶液1,2,3,4,5ml于10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,转入比色管中,于波长360nm比色。结果表明,芦丁在0.05~0.25mg之间呈良好的线性关系,r=0.9992。见表1及图1。表1芦丁线性关系考察溶质量m/mg吸光度(略)  2.2.2不同浓度乙醇的考察取本品粉末(过3号筛)约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入不同浓度的乙醇25ml,超

4、声处理30min,取出,放冷,摇匀,滤过。精密量续滤液1ml于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,拌匀,于水浴上挥干溶剂,转入层析柱。先用20ml苯洗,弃去苯液,然后用甲醇洗脱,定容至25ml。摇匀,于波长360nm测定吸收值,以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表2及图2。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表3及图3。表2不同浓度乙醇考察(略)表3不同浓度乙醇出膏率考察样品号干膏重/g出膏率()结果显示,随着乙醇浓度的增加总黄酮百分含量也在逐渐升高,在浓度到达70%后趋于平稳。出膏率则是在乙醇浓度到达80%后最高,而后呈下降趋势。因此选定80%乙醇为提取溶剂。  2.2.3不同提取时间的

5、考察取本品粉末(过3号筛)约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%乙醇25ml,室温浸泡不同的时间,取出,摇匀,滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,拌匀,于水浴上挥干溶剂,转入层析柱。先用20ml苯洗,弃去苯液,然后用甲醇洗脱,定容至25ml。摇匀,于波长360nm测定吸收值,以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表4及图4。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表5及图5。表4不同提取时间考察提取时间(略)表5不同提取时间出膏率考察提取时间t/h干膏重m/g出膏率(略)结果显示,蜂胶在提取2h后已提取完全,而出膏率4h高于2h,故选择提取时间为4h。 

6、 2.2.4不同提取温度的考察取本品粉末(过3号筛)约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%乙醇25ml,不同的温度下提取4h,取出,放冷,摇匀,滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,拌匀,于水浴上挥干溶剂,转入层析柱。先用20ml苯洗,弃去苯液,然后用甲醇洗脱,定容至25ml。摇匀,于波长360nm测定吸收值,以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表6及图6。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表7及图7。表6不同提取温度的考察(略)表7不同提取温度出膏率(略)结果显示,随着温度的升高总黄酮的百分含量先升高,后降低,在40℃达到最大。而出膏率则随着温度

7、的升高逐渐增加,这可能是由于随着温度的升高,蜂胶中其他物质的溶出量不断增加,导致出膏率增加而总黄酮提取量减少。因此提取温度选择在40℃为宜。  2.2.5不同料液比的考察取本品粉末(过3号筛)约0.25g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入不同量的80%乙醇,40℃下提取4h,取出,放冷,摇匀,滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,拌匀,于水浴上挥干溶剂,转入层析柱。先用20ml苯洗,弃去苯液,然后用甲醇洗脱,定

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