巴西蜂胶最佳提取工艺研究

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1、巴西蜂胶最佳提取工艺研究付梅红，方婧，王祝举，唐力英【摘要】　　目的　建立巴西蜂胶最佳提取工艺。方法进行了不同提取溶剂、不同提取时间、不同提取温度、不同料液比、不同提取次数的考察，以总黄酮为检测指标，优选提取工艺。结果最佳提取工艺为：加入蜂胶量40倍的80%乙醇，40℃提取4h，提取两次。结论该提取工艺合理、可行。【关键词】巴西蜂胶；提取工艺；总黄酮　　Abstract:ObjectiveTostudytheextractionmethodoftotalflavonoidsinBrazilianpropolis.Methodse,extractiontemperatureandsolve

2、ntquantityonrecoveryrateoftotalflavonoidsperatureofcircumfluenceeofextractionethodisconvenientandfeasible.　　Keyg的溶液，即得。　　2.1.2供试品溶液的制备　　取本品粉末（过三号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%乙醇10ml，40℃温浸4h，取出，放冷，摇匀，滤过，重复提取1次。合并滤液，精密量取续滤液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，拌匀，于水浴上挥干溶剂，转入层析柱。先用20ml苯洗，弃去苯液，然后用甲醇洗脱，定容至25ml。摇匀，即得。　　2.

3、1.3测定　　分别取对照品溶液和供试品溶液，于波长360nm测定吸收值。以芦丁为标准品测定标准曲线，求回归方程，计算供试品中总黄酮含量。　　2.2提取工艺的考察　　2.2.1线性关系考察精密吸取浓度为0.5mg/ml的芦丁对照品溶液1，2，3，4，5ml于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，转入比色管中，于波长360nm比色。结果表明，芦丁在0.05～0.25mg之间呈良好的线性关系，r=0.9992。见表1及图1。表1芦丁线性关系考察溶质量m/mg吸光度（略）　　2.2.2不同浓度乙醇的考察取本品粉末（过3号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入不同浓度的乙醇25ml，超

4、声处理30min，取出，放冷，摇匀，滤过。精密量续滤液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，拌匀，于水浴上挥干溶剂，转入层析柱。先用20ml苯洗，弃去苯液，然后用甲醇洗脱，定容至25ml。摇匀，于波长360nm测定吸收值，以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表2及图2。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表3及图3。表2不同浓度乙醇考察（略）表3不同浓度乙醇出膏率考察样品号干膏重/g出膏率（）结果显示，随着乙醇浓度的增加总黄酮百分含量也在逐渐升高，在浓度到达70%后趋于平稳。出膏率则是在乙醇浓度到达80%后最高，而后呈下降趋势。因此选定80%乙醇为提取溶剂。　　2.2.3不同提取时间的

5、考察取本品粉末（过3号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%乙醇25ml，室温浸泡不同的时间，取出，摇匀，滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，拌匀，于水浴上挥干溶剂，转入层析柱。先用20ml苯洗，弃去苯液，然后用甲醇洗脱，定容至25ml。摇匀，于波长360nm测定吸收值，以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表4及图4。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表5及图5。表4不同提取时间考察提取时间（略）表5不同提取时间出膏率考察提取时间t/h干膏重m/g出膏率（略）结果显示，蜂胶在提取2h后已提取完全，而出膏率4h高于2h，故选择提取时间为4h。　

6、　2.2.4不同提取温度的考察取本品粉末（过3号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%乙醇25ml，不同的温度下提取4h，取出，放冷，摇匀，滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，拌匀，于水浴上挥干溶剂，转入层析柱。先用20ml苯洗，弃去苯液，然后用甲醇洗脱，定容至25ml。摇匀，于波长360nm测定吸收值，以回归方程计算供试品中总黄酮含量。结果见表6及图6。同时测定了各个样品的出膏率。结果见表7及图7。表6不同提取温度的考察（略）表7不同提取温度出膏率（略）结果显示，随着温度的升高总黄酮的百分含量先升高，后降低，在40℃达到最大。而出膏率则随着温度

7、的升高逐渐增加，这可能是由于随着温度的升高，蜂胶中其他物质的溶出量不断增加，导致出膏率增加而总黄酮提取量减少。因此提取温度选择在40℃为宜。　　2.2.5不同料液比的考察取本品粉末（过3号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入不同量的80%乙醇，40℃下提取4h，取出，放冷，摇匀，滤过。精密量取续滤液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，拌匀，于水浴上挥干溶剂，转入层析柱。先用20ml苯洗，弃去苯液，然后用甲醇洗脱，定