正交设计优选蜂胶提取工艺研究

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1、陕西中医学院学报Journalof5haanxiCollegeofTraditionalChineseMedicineVol.28.No.1.2005.1正交设计优选蜂胶提取工艺研究王萍1张宁1白智华1指导:赵海2王昌利2(1.陕西中医学院研究生，陕西咸阳712083;2.陕西中医学院药学系，陕西咸阳712083)摘要:目的考察蜂胶最佳提取工艺。方挂以总黄酮含量、浸膏得率为评价指标，用正交实验法优选蜂胶最佳提取工艺。枯果乙醉用量对蜂胶总黄酮的提取有显著性影响;提取时间对浸青得率有显著性影响。祛格蜂胶最佳提取工艺条件为8倍量70%乙醇，温浸2次，每次1小时。关键词:蜂胶

2、;总黄酮;正交设计中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1002一168X(2005)O1一0034一02蜂胶是蜜蜂采集植物芽抱和树干上的树脂，并根据蜂胶理化性质知水提取效果差，适用乙醇混人其上颗腺分泌物及蜂蜡等的一种胶状天然活为溶剂提取，选择乙醇浓度、提取时间、提取次数、性物质。临床上具有抗菌、消炎、抑制病毒、镇痛、乙醇用量作为考察因素，以蜂胶总黄酮含量，浸膏促进组织再生、抗癌、增强肌体免疫功能等作用，还得率为评价指标。因素水平安排见表to可以作为食品天然防腐剂，被广泛应用于药品、食表1因素水平表品和化妆品等领域。〔‘〕。蜂胶的主要功能成分为A乙醉B提取C

3、提取D乙醉水平浓度(%)时iii](h)次数(次)用量(倍)总黄酮，故本文以总黄酮含量、浸膏得率为评价指弓土了0011jl8标，对蜂胶提取工艺进行优选。，70，一、勺10曰人-叶‘1.仪器与试药八只02内120﹂U1.1仪器751型分光光度计(上海分析仪器厂)2.2总黄酮测定1.2试药2.2.1标准曲线的制备:[2l芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);蜂胶精密称取干燥至恒重芦丁对照品43.5mg于(经本院生药教研室雷国莲教授鉴定为真品);以下50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。精密移取试剂均用分析纯配制:2.5%三氯化铝溶液、1%醋10m1于100ml量瓶中，用水

4、稀释至刻度。此溶液酸钾溶液、60%乙醇溶液。每毫升含芦丁871Ltg.2.方法与结果分别精密吸取87[cg"ml-1芦丁标准溶液0.012.1正交实验设计1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.Oml于7个25ml量瓶2.4.1处方土贝母皂昔0.5克、二甲基亚矾贝母皂昔注射液的副作用，研制了土贝母皂昔乳14毫升、三乙醇胺1.6克、甘油4.0克、蒸馏水54剂，并对乳剂的影响因素进行了试验研究。毫升、羊毛脂2.0克、白凡士林10克、硬脂酸163.2通过试验研究得到较理想的处方配制用克。经试验结果确定上述配方。量，为推广应用奠定了基础。2.4.2配制方法称取土贝母皂昔溶

5、于热的3.3本品为一个稳定的乳剂，在配制过程应注蒸馏水中，加人二甲基亚讽、三乙醇胺、甘油等水相意温度和搅拌速度，其速度对乳剂的均匀、外观有部分，搅匀，加热至70℃加人防腐剂，另将羊毛脂，较大的影响。白凡士林，硬脂酸加热至70r-，然后在搅拌下将水参考文献:相加人油相中，搅拌，放冷，即得。Ill傅章才，赵更生，房益兰，土贝母皂普的药理学研究3.讨论lil.陕西医药,1985,14(4):49-50.3.1土贝母皂昔具有抗病毒作用，对各种病毒【幻傅章才，徐汉卿，冯捷，等.消疵灵制剂治疗各种沈的疗效观察〔1l.中草药，1984,15(3):24.引起的庆类疾病有较强的治疗效

6、果。为了消除土(收稿日期:2004-09-28)万方数据陕西中医学院学报2005年第28卷第1期中，各加乙醇5ml,2.5%三氯化铝溶液3m1,1%醋进行方差分析，结果见表3、表40酸钾溶液5ml用水稀释至刻度，摇匀，放置30min,表3总黄酮含童方差分析表以空白溶液作对照，于751型分光光度计415nm方差来源F值显著性OD处测定吸收度，绘制浓度一吸收度曲线，得回归方总变异7291A，3.9683~11.6509程A=0.03631+0.03362X(X为总黄酮微克数)rB，6.︸17.6806C，=0.9999,0--21I.g"ml-1范围内线性良好。0.‘D2

7、2.2.2供试品溶液的制备:7.23.3064误差(e=C)称取蜂胶粉末约4g，精密称定，共9份，按正F(2,2)0.05=19，表示P<0.05.交实验表(见表2)于70'C温浸，过滤于100m1量瓶表4浸青得率方差分析表中，用乙醇洗涤残渣，定容，吸取1ml溶液置50m1方差来源SSF值显著性量瓶，加乙醇溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。00总变异6.6454A，2.2.3供试品含量的测定:1.2544山16.4181B，吸取供试品溶液5m12份，分别置于25m1量瓶4.4602︸58.8650C，0.0758︸中，1份加人2.5%三氯化铝溶液3m