正交实验优选夏枯草提取工艺的研究

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1、正交实验优选夏枯草提取工艺的研究【摘要】目的优选夏枯草的最佳提取条件。方法以齐墩果酸含量为指标，采用L3(34)正交实验，对影响超声提取的因素进行优选。结果最佳提取条件为乙醇浓度90%，用量20倍，时间40min。结论优选夏枯草提取工艺稳定、可行。【关键词】夏枯草正交实验齐墩果酸StudiesontheOrthogonalExperimentforOptimizationofExtractionProcedureofPrunellavulgarisL.Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofPrunellavulgarisL..

2、MethodsTheextractionprocessofPrunellavulgarisLwasoptimizedbyL3(34)orthogonaltestwithCaryophyllinasindex,andwithconcentrationofalcohol,amountofalcoholandextractiontime.ResultsTheoptimalextractiontechnologywas0%alcohol,0timestheamountofherbmaterialwith0mins.ConclusionTheoptimalextractionprocessisst

3、eadyandreliable.Keywords：PrunellavulgarisL.；Orthogonaltest；Caryophyllin夏枯草为唇形科植物夏枯草PrunellavulgarisL.的干燥果穗，我国各地均产，主产于江苏、浙江、安徽、河南等地［1］。夏枯草临床应用广泛，《中国药典》中载有“清火，明目，散结，消肿”［2］之功效，现代研究表明夏枯草还具有降血脂、降血糖、免疫抑制以及抗肿瘤等作用［3］。夏枯草中含有丰富的三萜类化合物，其中以齐墩果酸和熊果酸的含量最高。现采用正交实验法，以齐墩果酸为指标，对夏枯草的提取条件进行优化选择，为夏枯草的生产和应用提供依据。　　1仪器与

4、试药日立高效液相色谱仪，DAD检测器，EZChromElite色谱工作站；KQ-100A型超声波清洗器；电子天平。夏枯草对照药材及齐墩果酸对照品。甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。　　2方法与结果夏枯草对照药材粉末，60℃干燥至恒重，备用。.1提取方法选择实验.浸渍法取夏枯草药材粉末1g，加95%乙醇20ml，浸渍2h，时时摇动，滤过，浓缩干燥。.加热回流法　　取夏枯草药材粉末1g，加95%乙醇20ml，加热回流h，滤过，浓缩干燥。.超声法取夏枯草药材粉末1g，加95%乙醇20ml，超声30min，滤过，浓缩干燥。取上述夏枯草提取物样品，分别测定齐墩果酸含量，结果见表1。可见，3种提取方法

5、中，以超声法提取所得齐墩果酸含量最高，故选用超声法对夏枯草药材进行提取。表1种提取方法的比较.2提取条件的正交实验以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间为考察因素，每个因素各取3个水平。见表2。表2实验因素水平.3正交实验样品中齐墩果酸的含量测定.色谱条件色谱柱为HypersilC18；流动相为甲醇-水-冰醋酸；流速1ml/min；柱温25℃；检测波长210nm。.对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品适量，置10ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，制成含齐墩果酸mg/ml的溶液，作为对照品溶液。.标准曲线的绘制精密量取齐墩果酸对照品溶液，1，2，3，4，ml分别加流动相定容至10ml。在上

6、述色谱条件下重复进样3次，10μl/次，测定峰面积积分值，以峰面积积分平均值Y和浓度C进行线性回归，得回归方程为：Y=，r=，齐墩果酸溶液在～/ml范围内线性关系良好。.精密度实验精密吸取同一份对照品溶液，连续重复进样5次，测定结果RSD为%。.重复性实验按同一批夏枯草对照药材，依法重复提取并测定5次，测定结果RSD为%。.稳定性实验同一份供试品溶液分别于0，2，4，8，1h进样，测定结果RSD为%，表明供试品溶液在1h内稳定。.样品含量测定　　在平行操作条件下，按L3(34)正交设计实验，分别测定，结果见表3。方差分析见表4。表3正交实验结果表4方差分析　　3讨论通过比较浸渍法、加热回

7、流法、超声法3种提取方式，以超声法提取所得齐墩果酸含量最高，故选用超声法作为夏枯草的提取方法。本文以乙醇为溶媒，以齐墩果酸含量为指标，通过正交设计实验方法研究超声提取法提取夏枯草的工艺条件，并对影响提取较大的乙醇浓度、乙醇用量、超声时间等因素进行考查，筛选出最佳的提取工艺条件为乙醇浓度90%，用量20倍，时间40min。本提取工艺方法简便，节省时间，提取率高，为夏枯草的生产和应用提供了参考依据。【参考文献】　　［1］郑汉臣，蔡少青.