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1、正交试验优选葛根提取工艺正交试验优选葛根提取工艺更新日期:2011-01-24点击:徐新刚 路富玉 隋晓春 卢宁摘要:为探讨葛根的提取工艺条件,采用薄层扫描法,以葛根素为检测指标,用正交试验考察了4种因素(乙醇浓度、用量、提取时间及提取次数)对其含量的影响,并从中优选出确保葛根制剂质量及疗效的提取工艺。关键词:葛根; 葛根素; 乙醇; 薄层扫描中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2000)09-0780-01OptimizationoftheExtractingTechnolog
2、yforPuerarialobatabyOrthogonalTestXUXin-gang(ShandongResearchInstituteofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica,Jinan250014,China)LUFu-yu(FirstHospitalofTaianCity,ShandongProvince271000,China)SUIXiao-chun(JinanPharmaceuticalFactoryforTraditionalChineseDrug,
3、Jinan,Shandong250100,China)LUNing(TaianDrugStationofTCM,Taian,Shandong271000,China)Abstract:TostudytheextractingtechnicalconditionsofPuerarialobata,Puerarinasindex,TLC-scanningwasappliedwith,andorthogonalmethodwasusedforstudyingtheeffectoffourextractingfactors
4、onextractingrateofPuerarin(alcoholdensity,volume,timeandtimes)andanoptimumextractingprocessforPuerarialobatawaschosentoensurethequalityofpreparationandcurativeeffect.Keywords:Puerarialobataohwi; Puerarin; Alcohol; TLC-scanning 葛根为豆科植物野葛PuerariaLobata(Willd.)O
5、hwi或甘葛藤PuerariathomsoniiBenth.的干燥根,系常用中药,具有解肌清热、生津、透疹、升阳止泻之功效,中药制剂中使用较多。其工艺考察时多以总黄酮作为检测指标[1],而不同提取工艺对其中异黄酮成分葛根素的影响研究较少。据文献报道,葛根素有明显的扩张冠状血管作用[2]和显著降低四氧嘧啶致小鼠高血糖作用[3]。为更好地发挥葛根的药用功效,本文采用薄层扫描法。以葛根素为检测指标,用正交试验法对其生产工艺进行了优选。1 仪器与试药 岛津CS-9301薄层色谱扫描仪;硅胶G由青岛海洋化工厂生产;试验用药
6、材购自济南建联药材公司,经鉴定符合《中国药典》之规定;葛根素对照品由中国药品生物制品检定所提供;甲醇、氯仿为分析纯,乙醇为化学纯。2 方法与结果2.1 正交试验方案:根据单因素初筛试验结果,分别确定提取溶媒(乙醇)浓度、溶媒用量、提取时间及提取次数为试验因素,每个因素备选了3个水平,见表1。表1 正交试验因素水平表水平乙醇浓度A(%)提取时间B/h乙醇倍数C提取次数D160163270272380381 我们利用L9(34)正交表安排试验,每次试验均重复3次,重复试验与正交表中空列的误差性质完全一样,代表整体误差
7、。试验基本方法为:精称葛根药材粗颗粒50g,用乙醇提取,按正交顺序表试验,合并乙醇提取液,回收乙醇至尽,浓缩液置于蒸发皿中,水浴蒸干,得稠膏,备用。2.2 葛根素的含量测定2.2.1 对照品溶液配制:精密称取葛根素对照品5mg于5ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。2.2.2 供试品溶液制备:取正交试验顺序表中各所得稠膏,按重量比精称相当于1g葛根药材的稠膏,以甲醇溶解,定量转移至5ml量瓶中,稀释至刻度,摇匀,备用。2.2.3 薄层层析及扫描条件:用定量毛细管分别吸取对照品溶液及供试品溶液各2μl点于
8、同一块硅胶G-CMC-Na薄层板上。以氯仿-甲醇-水(16∶5∶2)下层液展开,挥干溶剂后,紫外灯(254nm)下检视,被检测组分葛根素显一蓝色荧光斑点,分离度好,结果见图1。经CS-9301薄层扫描仪测定,λS=255nm,λR=370nm,SX=3,狭缝0.4mm×0.4mm,双波长反射式锯齿扫描。2.2.4 线性关系的考察:分别吸取对照品溶液1,2,3
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