lps和tnfα对肺微血管内皮细胞内游离钙的影响论文

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1、LPS和TNFα对肺微血管内皮细胞内游离钙的影响论文肖贞良，全燕，李福祥，钱桂生【摘要】目的探讨脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)内游离钙浓度(Ca2+i)的影响。方法将细胞接种于盖玻片上，细胞单层汇合后进行实验。实验分组：LPS组(用10μg/mlLPS)，LPS+山莨菪碱组(用10μg/mlLPS+10μg/ml山莨菪碱)，TNFα组(用5000u/mlTNFα)，TNFα+山莨菪碱组(用5000u/mlTNFα+10μg/ml山莨菪碱).freeli

2、n后按照试剂盒提供的方法，并参照文献测定Ca2+i。结果与正常对照组比较，LPS组、LPS+山莨菪碱组15min和90min两个时相点Ca2+i均显著升高(P0.01);LPS组与LPS+山莨菪碱组比较，15min和90min两个时相点Ca2+i无明显差异(P0.05)。同样，与正常对照组比较，TNFα组、TNFα+山莨菪碱组15min和90min两个时相点Ca2+i均显著升高(P0.01);TNFα组与TNFα+山莨菪碱组比较，15min和90min两个时相点Ca2+i无明显差异(P0.05)。结论L

3、PS、TNFα作用可使RPMVECCa2+i显著升高，山莨菪碱对LPS、TNFα诱导的RPMVECCa2+i升高无显著抑制作用;LPS、TNFα引起的Ca2+i浓度升高与β-AR介导的信号转导通路无关;Ca2+i升高可能参与了G蛋白偶联受激酶的活性调节。【关键词】内皮细胞;游离钙;脂多糖;肿瘤坏死因子αAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectsoflipopolysaccharide(LPS)andtumornecrosisfactorα(TNFα)onintrac

4、ellularfreecalcium(Ca2+i)ofratpulmonarymicrovascularendothelialcells(RPMVEC)andtherelationshipbetountofcellss;experimentonolayerconfluented;groupdivisionintheexperimentlofLPSadded),LPS+anisodaminegroup(10μg/mlofLPSand10μg/mlofanisodamineadded),TNFαgroup(

5、5000μ/mlofTNFαadded),TNFα+anisodaminegroup(5000μ/mlofTNFαand10μg/mlofanisodamineadded)andnormalcontrolgroup(equalamountofdiluentadded),andeachgrouphad4samples.Ca2+i.Ineachgroupeasuredatthetimepointof15and90minuteethodfromreagentkitinstructionandliteratur

6、e.ResultCa2+iinLPSgroupandLPS+anisodaminegroupatthetimepointof15and90minutesalcontrolgroup(P0.01),butthereexistednosignificantdifferenceofCa2+ibetinegroupatthesametimepoints(P0.01);Ca2+iinTNFαgroupandTNFα+anisodaminegroupatthetimepointof15and90minutealco

7、ntrolgroup(P0.01)butthereinegroupatthetimepointof15and90minute.ConclusionsBothLPSandTNFαcanleadtothesignificantincreaseofCa2+iinRPMVEC;theincreaseofCa2+iisnotrelatedtothesignaltransductionpathediatedbybetaadrenoceptorlipopolysaccharidetumornecrosisfactor

8、α细胞内钙离子和cAMP作为细胞内第二信使，对于正确传导细胞内外的各种信息至关重要，是多种信号转导过程中的关键因子，在内皮细胞的损伤过程中也起着重要作用。细胞内游离钙浓度(Ca2+i)升高是多种因素引起血管内皮损伤必须的信号。我们既往的研究发现，脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)作用后大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)不仅出现β肾上腺素能受体(β-AR)下调，并且出现F-肌动蛋白解聚和RPMVEC单层通透性增高1-3。那么LPS