大黄对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究论文

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1、大黄对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究论文【摘要】目的观察大黄对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织TGF-β1和smad7表达的影响。方法采用腺嘌呤法建立大鼠慢性肾功能不全模型，治疗组予以大黄（4g/kg/d）灌胃。治疗4周后，检测各组大鼠的24小时尿蛋白定量、肾功能，通过组织学及蛋白印记观察肾组织TGF-β1和smad7的表达。结果治疗组大鼠的24h尿蛋白定量、肾功能明显增加（P＜0.01），而治疗组大鼠24h尿蛋白定量、肾功能较非治疗组减少（P＜0.05）。非治疗组大鼠肾组织TGF-β1、smad7表达较

2、正常组明显增加（P＜0.01）。结论大黄可降低慢性肾功能不全大鼠24小时尿蛋白、肾功能水平，抑制肾组织TGF-β1和smad7表达。大黄对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏TGF-β1和smad7表达有关。【关键词】大黄；慢性肾功能不全；腺嘌呤；转化生长因子-β1；smadAbstractObjectiveTostudytheeffectofDaiHuangonglomerulosclerosisandexpressionofTGF-β1andsmad7inratseasured.Theexpressi

3、onofTGF-β1andSmad7easured.Resultsparedad7.ConclusionDaiHuangcandiminishurineproteinexcretionandpreventglomerulosclerosisinsubtotallynephrectomizedrats.Thisprotectiveeffectispresumedtobeassociatedad7.Keyad7大黄为蓼科植物掌叶大黄，现代药理学研究发现，大黄有抗血小板聚集、降血脂、清除氧自由基、提升超氧化物歧化

4、酶(SOD)的活性.freelad7的蛋白表达及肾脏病理变化的影响，探讨大黄对慢性肾功能不全的疗效及作用机制。1材料与方法1.1材料湖北产中药材大黄。腺嘌呤(产品批号2007109)。兔抗TGF-β1、Smad7抗体；EnVision免疫组化试剂盒；BCA试剂盒。1.2实验动物分组和模型建立雄性SD大鼠60只，7周龄，体重190±20g。适应性饲养1周，随机分为正常组20只和腺嘌呤组40只。腺嘌呤组每日腺嘌呤300mg/kg灌胃，6周后以代谢笼留取24小时尿液，眶内静脉采血，测定24小时尿蛋白定量、血尿素氮

5、、血肌酐。检测发现全部造模成功。随机分为2组：非治疗组20只，治疗组20只。治疗组大鼠每日给予黄葵胶囊2g/kg·d灌胃，同时正常组和非治疗组给予等量生理盐水灌胃。4周后全部大鼠以代谢笼留取24小时尿液，眶内静脉采血，测定24小时尿蛋白定量、血尿素氮及肌酐。大鼠处死后取部分肾组织置于10％中性甲醛中固定，部分肾组织液氮保存用于蛋白印迹杂交方法（SF100ug/ul，aprotinin1ug/ml，leupeptin1ug/ml），匀浆后冰浴30分钟，然后4度12000g离心20分钟。提取蛋白后用BCA法测量

6、蛋白浓度。取等量蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，半干法转移至聚氟乙烯膜上，封闭液封闭，加入1：200稀释的TGF-β1抗体，4℃过夜。0.05％TBST洗膜3次，ECL显影。1.4统计学处理计量资料采用均数±标准差表示，数据用SPSS13.0软件包进行统计学处理。各组间均数比较采用单因素方差分析，P0.05认为有统计学意义(方差齐时用LSD法、方差不齐时用Tamhane法)。2结果2.1尿蛋白定量变化非治疗组和治疗组大鼠尿蛋白排泄明显高于正常组(P0.01)；治疗组大鼠尿蛋白定量与非治疗组比较有所降低

7、(P0.05)，见表1。2.2血清生化指标变化非治疗组和治疗组大鼠血肌酐明显高于正常组(P0.01)；治疗组大鼠血肌酐与非治疗组比较有所降低(P0.05)；尿素氮变化同血肌酐变化，见表1。表1各组大鼠尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐水平（）组别n尿蛋白定量(mg/d)尿素氮(mmol/L)肌酐（mol/L）正常组209.24±2.167.26±1.0348.26±9.36非治疗组20169.36±27.69*18.57±3.89*119.41±15.86*治疗组2089.1±17.34*▲14.18±5.34*▲

8、80.64±12.25*▲*与正常组相比，P0.01，▲与非治疗组相比，P0.05。2.3组织病理学改变在HE染色中，非治疗组大鼠可见明显的肾小球增生，系膜增殖，肾小球毛细血管部分塌陷，球囊粘连，部分肾小球完全硬化，间质有炎细胞浸润，部分肾小管已萎缩，系膜外基质显著增加（图1）。治疗组与非治疗组比较，肾小球损伤、硬化轻，肾间质炎细胞浸润少，间质纤维化。2.4肾组织TGF-β1和smad7用蛋白印记方法检测结果治疗