hplc法测定荣筋片中橙皮苷的含量论文

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1、HPLC法测定荣筋片中橙皮苷的含量论文辛丹，王跃飞，王强，潘桂湘【摘要】目的建立荣筋片中橙皮苷的HPLC含量测定方法。方法采用AgilentC18柱（4.6mm×250mm，5μm），乙腈-0.3%磷酸（体积比22∶78）作为流动相，流速为1.0mL/min，紫外检测波长为283nm.freelinethecontentofaurantiamarininRongjintabletsbyHPLC.MethodsTheanalysisn(4.6mm×250mm，5μm).Themixtureofacetonitrile-0.3%phosphoricacid(22∶78)obile

2、phase.ThefloL/min.Thedetection.Thecolumntemperatureethodethodissensitive,simple,accurateandreproducibleforthequalitycontrolofRongjintablets.Keyarin荣筋片为天津中医药大学第二附属医院的医院制剂，适用于严重的关节变形和强直性脊柱炎等病症的复方制剂，临床实验疗效显著，主要由蒺藜、沙苑子、陈皮、当归、续断、熟地黄等药物组成，具有补肾通督、养血柔筋、通络止痛的作用。方中陈皮的主要成分橙皮苷具有较强的抗炎作用［1］，且在中药新药的研发中,橙皮

3、苷常常被选为指标成分而用于定性和定量研究。因此，为了有效控制荣筋片的内在质量，选取方中陈皮所含的橙皮苷作为质控指标，采用HPLC法测定其含量，结果满意。1仪器与材料仪器：pom×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.3%磷酸（体积比22∶78），检测波长为283nm，流速为1.0mL/min，采用35℃柱温，理论塔板数按橙皮苷色谱峰计算不低于3000。2.2对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成0.02mg/mL的溶液，作为对照品溶液。2.3供试品溶液的制备取荣筋片数片，研细，取约1g，精密称定，置100mL三角瓶中，加甲醇25mL，称重，加热回流处理20mi

4、n，取出放冷，称重，补甲醇至原量，摇匀，过滤（0.45μm微孔滤膜），续滤液作为供试品溶液。2.4阴性对照溶液的制备原方去陈皮药材，按制剂工艺进行制备，得缺陈皮的阴性制剂。取阴性制剂1g，按“2.3”项下操作，制备阴性制剂对照液。2.5专属性试验按“2.1”项下的色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果：橙皮苷对照品和供试品色谱图中橙皮苷峰与其他组分峰基线分离，分离度大于1.5，保留时间为9.342min；阴性对照色谱图中与橙皮苷对照品以及供试品色谱图中相对应的保留时间处无色谱峰出现，表明其他组分对橙皮苷的测定无干扰,见

5、图1。A.对照品;B.样品;C.阴性对照（缺陈皮）图1HPLC色谱图（略）Fig.1HPLCChromatograms2.6线性关系考察精密称取于40℃真空干燥至恒重的橙皮苷对照品5.24mg，置25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成橙皮苷标准贮备液（209.6μg/mL）。分别配成209.6、104.8、52.4、26.2、13.1、6.55μg/mL的系列对照品溶液，分别吸取上述溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，以峰面积（A）为纵坐标，对照品质量浓度（ρ）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A＝16603ρ＋9628.4，r=0.9999，橙皮苷质量浓度在0.0655

6、～2.096μg/mL之间呈良好的线性关系。2.7精密度试验精密吸取同一份供试品溶液，连续进样6次，测定橙皮苷峰面积积分值，RSD为0.13%（n=6），表明精密度良好。2.8稳定性试验按“2.3”项下操作制备1份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10、12h测定橙皮苷面积，RSD为0.48%，结果显示供试品溶液在0～12h内基本稳定。2.9重复性试验取同一批号供试品（批号0611013）6份，各约1g，精密称定，分别按“2.3”项下操作，制备供试品溶液，测定含量，平均含量为1.191mg/g，RSD为1.1%（n=6），表明该方法的重复性较好。2.10加样回收率试验取已

7、知含量的制剂（批号0611013，含量为1.191mg/g），进行加样回收率试验。取数片荣筋片，研细，约0.5g，精密称定，置25mL三角瓶中，加入质量浓度为209.6μg/mL的标准贮备液适量，加入甲醇约25mL，称重，加热回流20min，取出放冷，称重，补甲醇至原量，摇匀，过滤（0.45μm微孔滤膜），依法测定，计算橙皮苷平均回收率为99.3％，RSD为0.84％。结果见表1。表1橙皮苷加样回收率试验结果（略）Tab.1Resultsofrecoverytest2.11供试品含量测定分别按“2.3”