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1、肾缺血预处理对兔未成熟心肌Bcl作者：孙忠东，高尚志，池一凡，夏家红，杨辰垣【关键词】缺血预处理EffectsofrenalischemicpreconditioningontheexpressionsofBcl2,Bax,FasprotEinsinimmaturemyocardialcellsinrabbits 【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofrenalischemicpreconditioning(RIP)onapoptosisandexpressionsofBcl2,Ba
2、xandFasprotEInsinimmaturemyocardialcellsinrabbits.METHODS:Isolatedodelmaturerabbitslydividedintocontrolgroup,ischemia/reperfusion(I/R)groupandRIPgroup.TheTUNEL,nucleosomalladderofDNAfragmentsandtheexpressionofBcl2,BaxandFasproteinsentsmaturemyocardialcellapoptosisa
3、ndaffectstheexpressionsofBcl2,BaxandFasproteins. 【Keyicpreconditioning;apoptosis;Bcl2;Bax;Fas 【摘要】目的：探讨肾缺血预处理(RIP)对兔未成熟心肌细胞凋亡和Bcl2,Bax,Fas蛋白表达的影响.方法：24只幼兔采用Langendorff离体心脏灌注模型，随机分为正常对照组（C）、心脏缺血/再灌注组(I/R)和肾缺血预处理组(RIP)，每组8只，测定各组未成熟心肌细胞凋亡和Bcl2,Bax,Fas蛋白表达.结果：RIP组与I/
4、R组比较，心肌细胞凋亡率明显减少［(4.19±1.13)%vs（12.30±2.10）%,P<0.01］，DNA片段梯光密度明显减少(57350±1765vs135200±3370,P<0.01),Bcl2表达增多(33525±1026vs12385±860,P<0.01),Bax(8640±768vs32472±1128,P<0.01)和Fas(8936±912vs32100±1260,P<0.01)表达明显减少.结论：RIP可减少缺血再灌注后兔未成熟心肌细胞凋亡和影响Bcl2,Bax,Fas
5、蛋白的表达. 【关键词】肾；缺血预处理；细胞凋亡；Bcl2；Bax；Fas 0引言 实验表明，成熟心肌和心肌外的组织器官缺血预处理可减少心肌细胞凋亡的发生，其中Bcl2,Bax,Fas等基因蛋白的表达在细胞凋亡中起重要作用.肾缺血预处理(renalischemicpreconditioning,RIP)对未成熟心肌细胞凋亡是否有影响的报道甚少.本实验目的是观察RIP对兔未成熟心肌细胞凋亡和Bcl2,Bax,Fas等基因蛋白表达的影响. 1材料和方法 1.1材料 出生14～21d的健康长耳大白兔24只(华中科技大学
6、同济医学院动物室提供)，雌雄不拘.MPIAS1000型多媒体病理图像分析系统（华中科技大学同济医学院清平影像工程公司生产）进行光密度测定.细胞凋亡试剂盒购自南京建成生物技术有限公司. 1.2方法 1.2.1模型建立及分组按处理方式不同将动物随机分为3组,每组8只.开胸，右心耳注入肝素(300U/kg)，切开主动脉插入灌注管，即行KH液Langendorff灌流，灌注压为6kPa(45.0mmHg).切取心脏，结扎肺静脉，剪开左心耳将内径3mm左房灌注管插入左房，内径1mm测压管插入左心室.左房灌注压为1kPa(7.5mm
7、Hg)，左心后负荷为3.0kPa(22.5mmHg).KH缓冲液成分(mmol/L):NaCl118.50,KCl4.70,CaCl22.50,MgSO41.20,NaHCO325.00,KH2PO41.20,Glucose11.10,Na2EDTA0.50.使用时新鲜配制，经0.45μm滤器过滤，灌流前给予体积分数为950mL/LO2和50mL/LCO2混合气体按1.5L/min向储液瓶内的灌流液中通气30min，灌流液维持在37℃，pH为7.4，渗透压为824~850kPa/L［320~330mosm/L,1mosm=2
8、.5787kPa(37℃)］.①正常对照组（C）:仅灌注KH液180min，然后取心肌标本.②缺血/再灌注组(I/R)：灌注20min后，停灌45min，复灌120min.③肾缺血预处理组(RIP)：反复2次阻断肾血流5min/放开5min，建立Langendorff模型，然后重复I/R组
