缺血预处理对大鼠缺血再灌注小肠能量代谢、bcl

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1、缺血预处理对大鼠缺血再灌注小肠能量代谢、Bcl【关键词】缺血预处理EffectofischemicpreconditioningonenergymetabolismandexpressionsofBcl2andBaxinischemia/reperfusionofratsmallintestine　　【Abstract】AIM:Tostudytheeffectofischemicpreconditioningoncellapoptosisfolloia/reperfusioninratsandexplorethEirrelationship.METHO

2、DS：ThirtysixSDratsizedinto3groupseachconsistingof12rats:shamoperatedcontrolgroup(Cgroup),ischemicreperfusiongroup(I/Rgroup,theanteriormesentericarteryocclusionfor60minfolloin),ischemicpreconditioninggroup(IPCI/R,clampingtheanteriormesentericarteryfor10minfollopingitfor10min,allf

3、or4timesbeforeI/R).ImmunohistochemistryineAvalue.TUNELmethodarkablyloarkablyhigherthanthatinCgroup(P<0.05).paredicpreconditioningcancurbATPdegeneration,enhancetheexpressionofBcl2,decreasetheexpressionofBax,inhibittheapoptosisfolloallintestinalischemicreperfusion.　　　　【Keyallin

4、testine;preconditioning;ischemicreperfusion;apoptosis;gene　　【摘要】目的：探讨缺血预处理对小肠细胞能量代谢和凋亡基因bcl2，bax表达的影响及它们与肠细胞凋亡的内在联系.方法：健康SD大鼠36只，雌雄不限，随机分为3组，空白对照组（C组）、缺血预处理组（IPCI/R组）和缺血再灌注组（I/R组），每组12只.按Murry法制备缺血预处理模型，I/R组用血管钳夹闭肠系膜前动脉1h，再灌注2h,IPI/R组用血管钳夹闭肠系膜前动脉10min松开10min，反复4次，余同I/R组.高效液相色谱法测

5、定ATP，ADP含量；免疫组化检测Bcl2及Bax蛋白的表达，每组选24个视野分别测量A值.TUNEL法检测凋亡的小肠细胞并计算凋亡指数.结果：C和IPCI/R组ATP含量高于I/R组（P<0.05）；IPCI/R组Bcl2A值高于C组和I/R组（P<0.01），I/R组Bcl2A值低于C组（P<0.05）；I/R组BaxA值明显高于C组和IPCI/R组（P<0.01），且IPCI/R组高于C组（P<0.05）；与C组比较，I/R组和IPCI/R组凋亡指数较高（P<0.01,P<0.05）;与I/R组相比，IP

6、CI/R组凋亡指数较低（P<0.01）.结论：缺血预处理能在一定程度上延缓ATP降解并调控Bcl2及Bax蛋白的表达、抑制缺血再灌注介导的小肠细胞凋亡.　　【关键词】小肠；缺血预处理；缺血再灌注；细胞凋亡；基因　　0引言　　肠缺血再灌注损伤广泛见于临床，是导致多脏器功能障碍的重要原因.研究表明，凋亡是其损伤的主要方式，与细胞的能量代谢和凋亡基因的蛋白表达有关.缺血预处理（ischemicpreconditioning,IP）对缺血再灌注小肠有较好的保护作用［1-2］，但它对细胞凋亡的影响研究较少.我们通过大鼠小肠缺血预处理模型，从细胞凋亡的角度探

7、讨缺血预处理对小肠细胞凋亡基因bcl2和bax表达的影响.　　1材料和方法　　1.1材料Bcl2mAb，BaxmAb，SP试剂盒、原位细胞凋亡检测试剂盒（均为SantaCruz公司产品，USA）；ATP，ADP标准品（Sigma公司，USA）.　　1.2方法　　1.2.1动物分组与模型制备健康SD大鼠36只(由武汉大学实验动物中心提供)，体质量225~275g，雌雄不限.随机分为空白对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血预处理组(IPCI/R组).术前12h禁食不禁水，20%氨基甲酸乙酯1g/kg腹腔注射麻醉，腹中线切开，找到肠系膜前动脉，C组

8、不夹闭肠系膜前动脉；I/R组用血管钳夹闭肠系膜前动脉1h，再灌注2h，IPCI/R组依据in,