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1、复合预处理对大鼠肠缺血再灌注的保护作用论文【关键词】小肠Protectiveeffectofpoundpreconditioningonsmallintestinefromischemiareperfusioninjuryinrats【Abstract】AIM:Toinvestigatetheprotectiveeffectofpoundprecondition(ischemicpreconditioningunderthemildhypothermiaMHIP)onsmallintestinefromischemiareperfusion(I
2、/R)injuryinratsanditsmechanism.METHODS:Thirtytizedinto4groups(8ineachgroup):Shamoperatedgroup(sham),ischemiareperfusion(I/R)group,ischemicpreconditioning(IP)group,mildhypothermiaischemicpreconditioning(MHIP)group.Thealondialdehyde(MDA),andactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD)
3、andtotalantioxidase(TAX)inblooducosatissueayberelatedtoenhancingoxidationresistanceofintestine,inhibitinglipidperoxidation,upregulatingtheproteinexpressionofbcl2genesanddoyocyteapoptosis.【Keyall;reperfusion;mildhypothermia;ischemicpreconditioning;geneexpression【摘要】目的：探讨复合预处理
4、（亚低温下缺血预处理）对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法：将32只大鼠随机分为4组（每组8只）：假手术对照组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、缺血预处理组（IP）、亚低温预处理组（MHIP）.比较各组小肠组织湿干质量比、Ca2+Mg2+ATP酶含量及血清乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活力、总抗氧化（TAX）能力的变化，并观察各组肠组织超微结构及Bcl2,Bax蛋白表达.结果:肠缺血再灌注后小肠湿干质量比值增高,LDH,MDA含量明显上升（P0.01），Ca2+Mg2+ATP酶、SOD活性及TAX
5、能力明显下降，小肠组织Bcl2和Bax蛋白表达吸光度（A）明显增高（P0.01）；IP组与I/R组比较及MHIP组与IP组比较小肠湿干质量比值减小，LDH，MDA含量明显下降，Ca2+Mg2+ATP酶、SOD活性及TAX能力明显上升，小肠组织Bcl2蛋白表达吸光度（A）值增高.freel）：仅暴露肠系膜上动脉（SMA）而不夹闭，共2h结束实验后取材；②缺血灌注组（Ischemiareperfusion,I/R）：夹闭SMA60min后松夹60min再取材；③缺血预处理组（Ischemicpreconditioning,IP）：夹闭SMA5min
6、和松夹5min作为预处理，余同I/R组；④亚低温预处理组（mildhypothermiaischemicpreconditioning,MHIP）：在实施缺血预处理前在小肠周围充填碎冰造成小肠亚低温（33~35℃）［3］，余同IP组.1.1.2药品及试剂乳酸脱氢酶（LDH）、Ca2+Mg2+ATP酶含量、总抗氧化（TAX）能力、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）活性试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，Bcl2,Bax免疫试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供，其他试剂均为国产分析纯.结果测定按试剂盒提供的说明书严格进行操作.1.2方法1
7、.2.1模型制备100mLL-1水合氯醛（3.5mLkg-1,ip）麻醉后，仰卧固定，取腹部正中切口，暴露SMA,用无损伤动脉夹夹闭其根部导致缺血，松夹即为再灌注，在各设定时相点经髂动脉取血并迅速放血致死，同时取中段小肠匀浆.1.2.2指标测定①取定量肠组织制备组织匀浆测定Ca2+Mg2+ATP酶活性，并留取肠组织观察组织湿干质量比值；经髂动脉取血分离血浆，测定LDH活性，SOD,MDA含量，TAX能力；②冰冻切片后，用免疫组化方法，通过DAB显色，观察bcl2及bax蛋白表达，在显微镜下用图像分析系统检测吸光度（A）值（每组选10个视野分别测
8、量，计算均值）；③冰冻切片后，光镜下观察并拍片，根据Chiu肠粘膜损伤进行分级，电镜标本严格制片，在日立H600透视电镜下观察并拍片.统计学处理：所有
