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1、心肌缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡的影响作者：孙忠东，池一凡，杨铁南，侯文明，牛兆倬，唐子龙【关键词】缺血预处理摘要：目的探讨心肌缺血预处理(MIP)对未成熟心肌bcl-2、bax、fas蛋白表达的影响。方法采用兔Langendorff模型，24只幼兔随机分为3组，对照组(C,n=8)：仅灌注KH液180min，然后取标本；缺血/再灌注组（I/R,n=8）：灌注20min后，停灌45min，复灌120min；心肌缺血预处理组(MIP,n=8)，灌注20min，反复2次停灌5min，复灌5min，然后重复I/R组缺血/再灌方法。以凋亡细胞原位标记、琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯及bcl-2、
2、bax、fas蛋白表达作为检查指标。结果琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯：MIP组与I/R组比较，光密度明显减弱；MIP组与I/R组比较，bcl-2表达明显增多，bax、fas表达明显减少。结论MIP通过影响bcl-2、bax、fas基因蛋白的表达减少心肌细胞凋亡。 关键词：缺血预处理；心肌；细胞凋亡；基因蛋白 TheEffectsofMyocardialIschemicPreconditioningonImmatureMyocardialCellApoptosis Abstract:OBJECTIVEToinvestigatetheeffectsofmyocardialischem
3、icpreconditioning(MIP)onimmaturemyocardialcellapoptosisandexpressionofbcl-2,bax,fasprotEin.METHODSIsolatedodelinutes.Ischemia/reperfusion(I/R)groupinutes,andthenkeptunderischemia45minutes,folloinutes.Myocardialischemicpreconditioning(MIP)groupinutes,andthenrepeatlyischemia5minutesfolloinutes2times
4、,finnalyreperfused120minutes.Suchindexes,includingtheTUNEL,nucleosomalladderofDNAfragments,andtheexpressionofbcl-2,bax,andfasgeneents,expressionofbaxandfasgene,andincreaseinexpressionofbcl-2gene.CONCLUSIONThisstudydemonstratedthatMIPdecreaseimmaturemyocardialcellapoptosisbyaffectingtheexpressionof
5、bcl-2,bax,andfasgene. Keyicpreconditioning;Myocardial;Apoptosis;Geneproteins 细胞凋亡(apoptosis)是指有核的细胞在一定条件下通过启动自身的机制而发生的一种自然死亡过程。细胞凋亡广泛参与机体的正常发育和各种病理生理过程。细胞凋亡发生不足或凋亡过度均可以导致机体发生多种病理生理变化。在成熟心肌实验表明MIP可减少心肌细胞凋亡的发生，其中bcl-2、bax、fas等基因蛋白的表达在细胞凋亡中起重要作用。MIP对未成熟心肌细胞凋亡有否影响，尚未可知。本实验目的观察MIP对未成熟心肌细胞凋亡和bcl-2、bax
6、、fas等基因蛋白的表达的影响。 1材料与方法 1.1动物模型的建立 出生14~21d的健康新生长耳大白兔24只，雌雄不拘。开胸，右心耳注入肝素(300IU/kg)，切开主动脉插入灌注管，即行KH液Langendorff灌流，灌注压为45mmHg。切取心脏，结扎肺静脉，剪开左心耳将内径3mm左房灌注管插入左房，内径1mm测压管插入左心室。左房灌注压为7.5mmHg，左心后负荷为22.5mmHg。KH缓冲液成分(mmol/L):NaCl118.5,KCl4.70,CaCl22.50,MgSO41.20,NaHCO325.00,KH2PO41.20,Glucose11.10,Na2EDT
7、A0.50。使用时新鲜配制，经0.45μm滤器过滤，灌流前给予体积分数为95%O2和5%CO2混合气体按1.5L/min向储液瓶内的灌流液中通气30min，灌流液维持在37℃，pH为7.4，渗透压为320~330mOsm/L。 1.2分组及方法 随机分为3组,常规建立Langendorff模型。①对照组（C）组：仅灌注KH液180min，然后取标本。②缺血/再灌(I/R)组：灌注20min后，停灌45min，复灌12
