不同强度+gz暴露对大鼠心肌细胞凋亡的影响

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1、不同强度+Gz暴露对大鼠心肌细胞凋亡的影响作者：郑军，王永春，刘成刚，孙喜庆，石菲，卫晓阳【关键词】＋Gz;心肌/细胞学；细胞凋亡；大鼠　　Effectsofdifferent+Gzexposureoncardiocyteapoptosisinrats　　【Abstract】AIM:Toexploretheeffectsofdifferent+Gzexposureoncardiocyteapoptosisinrats.METHODS:Tizedinto3groups:controlgroup,＋6Gz/3mingroupand＋10Gz/3mingroup.Theratsinaldeoxyn

2、ucleotidetransferasemediateddUTPnickendlabeling（TUNEL）method.RESULTS:Thecardiocyteapoptosisincontrolgrouperouslyinthe+Gzexposuregroups.paredberofcardiocyteapoptosisincreasedsignificantlyin＋6Gzexposuregroup（P<0.05）.Thenumberofcardiocyteapoptosisincreasedsignificantlyinthe＋10Gz/3mingroupthanthatin

3、the＋6Gz/3mingroupandcontrolgroup（P<0.05）.CONCLUSION:Thecardiocyteapoptosiscanbeinducedberofcardiocyteapoptosisincreasesgradually.　　【Keyyocardium/cytology;apoptosis;rats　　【摘要】目的：探讨不同强度的持续性正加速度（＋Gz）对大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法：12只SD大鼠随机分为对照组、+6Gz暴露组、+10Gz暴露组，每组4只，+Gz暴露组分别给予+6Gz和+10Gz负荷刺激3min，于暴露后6h取大鼠心肌组织，用原位末

4、端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡情况并计数.结果：对照组大鼠偶见TUNEL阳性染色的心肌凋亡细胞；＋6Gz暴露组大鼠心肌凋亡细胞数较对照组显著增多（P<0.05）；＋10Gz暴露组大鼠心肌凋亡阳性细胞数较对照组及＋6Gz组均明显增多（P<0.05）.结论：＋Gz暴露可以引起大鼠心肌细胞凋亡，且随着G值的增大，心肌凋亡细胞数目逐渐增多.　　【关键词】＋Gz;心肌/细胞学；细胞凋亡；大鼠　　0引言　　现代高性能战斗机在机动飞行中所产生的正加速度（＋Gz）具有高G值、快增长率、持续时间长并可反复出现等特点，其加速度过载已远远超过飞行员的生理耐受限度，成为威胁飞行安全的主要因素.在

5、航空飞行中，+Gz几乎对机体各个系统均产生不良影响，尤其是对心脑系统的影响最为明显.有关+Gz暴露对心脏方面的影响及其机制，以往在整体和器官水平上已做过大量的研究，但有关在＋Gz暴露后，细胞凋亡及其调控因子在心脏病理生理变化中的作用的研究还很少.本研究通过不同G值的＋Gz暴露后，观察大鼠心肌凋亡细胞的产生情况，以进一步探讨＋Gz暴露致大鼠心肌细胞的损伤机制，为＋Gz暴露对心脏的损伤防护提供理论基础.　　1材料和方法　　1.1材料雄性SD大鼠12只(第四军医大学实验动物中心提供)，体质量（225±25）g，随机分为3组，即对照组、+6Gz暴露组、+10Gz暴露组，每组4只.　　1.2方法　　1

6、.2.1+Gz暴露方式采用动物离心机模拟+Gz暴露.利用自制的有机玻璃盒(内径15cm×5cm×4cm)承载大鼠，固定于动物离心机上.大鼠头朝向离心机轴心.离心机半径为2m，由计算机进行加速度程序控制.实验组暴露条件为：G值分别为+6Gz和+10Gz，峰值持续时间为3min，加速度增长率为1G/s.对照组仅按上述方法固定3min，不进行＋Gz暴露.动物＋Gz暴露后6h断头法处死，取心肌组织在4%中性甲醛固定、石蜡包埋切片后，置于APES处理的载玻片上.　　1.2.2原位末端标记(TUNEL)采用华美生物工程公司检测试剂盒，具体流程：组织切片常规脱蜡至水后,分别经蛋白酶K(20mg/L),1g

7、/LTritonX100溶液、平衡缓冲液处理后，滴加混合反应液37℃孵育60min，反应液中含末端脱氧核苷酸转移酶(TdT),生物素标记的核苷酸.再滴加链亲和标记的过氧化物酶37℃孵育30min，经DAB显色后,苏木素衬染，显微镜下观察并拍照.以上各步骤间均用0.01mol/LPBS冲洗3×5min.实验中设立不加TdT的阴性对照组.在10×10倍的光镜视野下，分别对各组切片的TUNEL染色阳性细胞进行计数，