安心颗粒对阿霉素性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

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1、安心颗粒对阿霉素性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响【摘要】目的:探讨安心颗粒对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:将50只雌性SD大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、卡托普利组(C组)、安心颗粒小剂量组(D组)、安心颗粒大剂量组(E组)，每组10只.B～E组给予阿霉素腹腔注射造模，C～E组同时灌胃给药.连续给药6ycin.METHODS:FiftyfemaleSDratslydividedinto5groups(n=10/group),namelynormalcontrolgroup(A),model

2、group(B),captoprilcontrolgroup(C),loycinodel.Atthesametime,captoprilandAnxingranulainisteredigingroupC,DandE,respectively.After6inistration,leftventriculartissuesoftheratseasurecardiocyteapoptosisbyTUNELandtocounttheindexofapoptosis.RESULTS:Theindexofcard

3、iocyteapoptosisingroupAycin,ADR）粉针由深圳万乐药业有限公司生产，批号：0501E2.试剂：原位细胞凋亡检测试剂盒为德国Roche公司生产；DAB显色剂为北京中杉金桥生物技术有限公司生产.　　　　1.2方法　　1.2.1动物模型制作参照《现代医学实验动物学》，将注射用ADR粉针用灭菌注射用水5mL溶解，9mL/L生理盐水稀释配成每lmL生理盐水含药0.8mg溶液，第1～3周按3mg/kg剂量给模型组和用药组大鼠进行腹腔注射，第4～6周按2mg/kg剂量进行腹腔注射，1次/g/

4、kg灌胃；D组和E组分别给予安心颗粒小剂量0.8g/kg，大剂量1.6g/kg灌胃，用药剂量分别按动物体表面积换算.A组给予等量的蒸馏水灌胃.1次/d，自由饮食.　　1.2.3指标检测末次给药24h，用颈椎脱臼法处死大鼠，剖胸取出心脏，洗净后取部分左心室组织，用40mL/L多聚甲醛液固定12h，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片备病理形态学观察.并按照试剂盒的说明操作，用TUNEL法检测细胞凋亡，以细胞核被染成棕褐色为阳性结果.每个标本观察5张切片，每张切片计数5个高倍视野（×400）中的凋亡阳性细

5、胞核数/总细胞核数，取其平均值作为心肌细胞凋亡指数（AI）.　　统计学处理:计量资料用表示,多组间比较用KruskalWallis秩和检验，组间两两比较用Wilcoxon秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义.全部数据采用SPSS12.0统计软件分析.　　2结果　　2.1各组大鼠行为及病理形态学观察从实验第3周起，B组大鼠开始出现中毒症状，表现为精神差，活动少，食量减，腹泻，皮毛疏松.第4周起，逐渐出现腹水，倚笼而立，气喘痰呜，紫绀，唇舌青紫，肢冷，皮下水肿等HF表现.而C,D,E组出现中毒症

6、状和HF较B组晚，且程度轻.从动物行为观察，符合中医阳虚水停、夹痰夹瘀证候.整个实验过程中，B组有3只大鼠死于HF,C,D,E组各有2只，A组有1只因灌胃不当而当场死亡.　　　　光镜下各组大鼠心肌组织切片可见肥大的心肌细胞群,细胞排列紊乱，断裂、溶解、炎症细胞浸润，但C,D,E组均较B组轻.B组肺病理图片放大（×400）后，可见肺泡壁破裂、融合、水肿、瘀血改变，且肝HE染色可见肝窦扩张瘀血.　　2.2心肌细胞AI比较A组心肌细胞凋亡指数均比B,C,D,E组低［3.3±0.8vs23.3±4.0,13.5±

7、3.8,18.1±4.2,14.3±3.9（均P<0.01）］，而B组的心肌细胞AI均较C,D,E组高（P<0.05或P<0.01），表明C,D,E组均有抑制心肌细胞凋亡的作用.2.3各组大鼠心肌细胞凋亡的图片模型组显示棕褐色细胞核明显增多，正常组偶见，卡托普利组、安心颗粒小剂量组较少(图1).　　3讨论　　HF属于中医“心悸”、“喘证”、“水肿”等病证范畴，其病位在心，而与肝、脾、肺、肾均有关，治疗上多强调温阳利水.笔者认为，HF的基本病机以阳气虚衰为本，瘀血、痰饮、水湿互结为标.心阳

8、虚衰是HF的发病基础，血瘀、痰饮、水湿是其主要病理产物，三者互为因果，构成HF错综复杂的病理过程，故为沉痼之疾.安心颗粒是补气、通阳、化痰、逐瘀中药配方提取而制成，方中人参大补元气；桂枝通阳化气，辅人参以振奋心阳；瓜蒌化痰泄浊、水蛭破血逐瘀，佐人参以畅通血脉；茯苓利水渗湿，为人参之使.现代药理研究表明［3］，人参小剂量有兴奋心脏作用，可增强心肌收缩力；桂枝挥发油有强心、利尿作用；瓜蒌能扩张冠状动脉，对急性心肌缺血有显著保护作用