安心颗粒对心衰大鼠血清tnfα、il6及心肌细胞凋亡的影响论文

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1、安心颗粒对心衰大鼠血清TNFα、IL6及心肌细胞凋亡的影响论文【摘要】【目的】观察安心颗粒对慢性心力衰竭（CHF）模型大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素6（IL6）水平及心肌细胞凋亡的影响。【方法】将50只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、安心颗粒低剂量组和安心颗粒高剂量组。采用阿霉素腹腔注射造模，每周1次，连续6周。造模同时，卡托普利组及安心颗粒低、高剂量组分别按６.２５mg·kg-1·d-1、0.8g·kg-1·d-1、1.6g·kg-1·d-1剂量

2、灌胃给药。造模结束后,分别测定各组血清TNFα、IL6水平与心肌细胞凋亡指数（Ｉ凋亡）。【结果】模型组血清TNFα、IL6水平及Ｉ凋亡均显著性升高（Ｐ＜０.０５）；安心颗粒低、高剂量组均可显著性降低模型大鼠血清ＴＮＦα、ＩＬ６水平及Ｉ凋亡（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜０.０１），且呈现一定剂量效应关系。【结论】安心颗粒可通过调控炎性细胞因子,抑制心肌细胞凋亡,阻止心力衰竭的发展。【关键词】安心颗粒／药理学心力衰竭慢性／中药疗法细胞凋亡细胞因子心肌／病理学疾病模型动物大鼠研究表明心力衰竭时有广泛

3、的心肌细胞凋亡存在,心肌细胞凋亡发生参与了心力衰竭的心肌重塑,.freelg/mL溶液，第1～3周按3mg/kg剂量给模型组和用药组大鼠进行腹腔注射，第4～6周再按2mg/kg剂量进行腹腔注射，正常对照组大鼠注射等容积的生理盐水，均每周1次，连续6周。以出现心力衰竭病理改变为造模成功。1.4分组及给药大鼠在用基础饲料适应性喂养1周后，随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、安心颗粒低剂量组、安心颗粒高剂量组，每组10只，分笼饲养。造模同时，卡托普利组以6.25mg/kg剂量灌胃，安心颗粒低、高剂

4、量组分别按0.8g/kg和1.6g/kg剂量灌胃，用药剂量按动物体表面积换算。正常对照组予等容积蒸馏水灌胃。每日1次，自由饮食。1.5细胞因子及心肌细胞凋亡检测末次给药24h，取大鼠主动脉血5mL，分离血清，然后用颈椎脱臼法处死大鼠，剖胸取出心脏，洗净后切取部分左心室组织，用40g/L多聚甲醛液固定12h，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片进行形态学观察。血清细胞因子TNFα、IL6检测：采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法，严格按试剂盒说明操作。心肌细胞凋亡检测：采用TUNEL

5、法，按试剂盒说明操作，以细胞核被染成棕褐色为阳性结果。每个标本观察5张切片，每张切片随机选取5个高倍视野（×400）中的凋亡阳性细胞，计算平均阳性细胞百分数。按公式计算凋亡指数：Ｉ凋亡=n凋亡细胞核/n总细胞核。1.6统计学方法采用SPSS12.0统计软件进行统计分析。2结果2.1各组大鼠心肌病理形态学观察光镜下观察心肌组织切片，正常对照组大鼠可见心肌形态正常，胞浆纹理清晰。其他各组可见程度不同的肥大心肌细胞群，细胞排列紊乱，断裂、溶解、炎性细胞浸润，卡托普利组及安心颗粒低、高剂量组较模型组改变

6、较轻。模型组还可见肺泡壁破裂、融合、水肿、淤血改变，且肝组织苏木素-伊红（HE）染色可见肝窦扩张淤血，提示心衰模型制备成功。结果见图1。2.2各组大鼠血清TNFα、IL6及心肌细胞凋亡指数比较在造模过程中，模型组有3只，卡托普利组及安心颗粒低、高剂量组各有2只大鼠死于心力衰竭，正常对照组有1只因灌胃不当死亡。表1结果显示：模型组血清ＴＮＦα、ＩＬ６水平及Ｉ凋亡均显著性升高（Ｐ＜０.０５），安心颗粒低、高剂量组均可显著性降低模型大鼠的血清ＴＮＦα、ＩＬ６水平及Ｉ凋亡（Ｐ＜０.０５或Ｐ＜

7、０.０１），且呈一定的剂量效应关系。2.3各组大鼠心肌细胞凋亡图片比较模型组可见棕褐色细胞核明显增多，正常对照组偶见，卡托普利组及安心颗粒低、高剂量组均较少，结果见图2。a1.正常对照组心肌b1.模型组心肌c.卡托普利组心肌d.安心颗粒低剂量组心肌e.安心颗粒高剂量组心肌a2.正常对照组肺b2.模型组肺a3.正常对照组肝b3.模型组肝图1各组大鼠心肌、肺、肝组织病理形态学改变（×200）（略）Figure1Changesofpathologicfeatureinheart，lungandlive

8、rtissuesofdifferentgroups表1各组血清TNFα、IL6及心肌细胞I凋亡比较（略）Table1parisonofserumTNFα,IL6andcardiomyocyteAIindifferentgroups统计方法：单因素方差分析；①Ｐ＜０.０５，与正常对照组比较；②Ｐ＜０.０５，③Ｐ＜０.０１，与模型组比较；④Ｐ＜０.０１，与安心颗粒低剂量组比较a.正常对照组b.模型组c.卡托普利组d.安心颗粒低剂量组e.安心颗粒高剂量组图2各组大鼠细胞凋亡检测比较（TUNEL