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时间:2018-11-01
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1、丹参酮对D半乳糖Aβ140致痴呆大鼠海马内【摘要】目的探讨丹参酮对D半乳糖Aβ140致复合痴呆模型大鼠海马内β淀粉样蛋白(Aβ)和乙酰胆碱酯酶(AChE)表达的影响。方法实验动物随机分成AD模型组、丹参酮治疗组和溶媒对照组。采用免疫组织化学和酶组织化学方法,分别观察大鼠海马内Aβ和AChE表达的变化。结果AD模型组大鼠海马内Aβir细胞数显著增多,平均光密度增强;AChE阳性神经纤维受损,光密度下降(含阳性面积百分比和光密度);与溶媒对照组比较差异显著(P<0.01)。丹参
2、酮处理后,Aβir细胞数明显减少,光密度也下降;AChE阳性神经纤维密度增强,与AD模型组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论丹参酮改善D半乳糖Aβ140致复合痴呆大鼠学习记忆障碍的作用机制,可能与降低海马内Aβ的表达而保护脑内胆碱能神经有关。【关键词】丹参酮;D半乳糖;β淀粉样肽蛋白;乙酰胆碱酯酶;海马【Abstract】ObjectiveToinvestigateinfluenceoftanshinoneonlevelsofβamyloid(Aβ)andacetyl
3、cholinesterase(AchE)inhippocampusofdementiamodelratsinducedbyDgalactosebinationlydividedintoAlzheimer′sdisease(AD)model,tanshinonetreatment,andsolventcontrolgroups.TheexpressionofAβandAChEinratshippocampusmunohistochemicalandenzymehistochemicalmeth
4、ods.ResultsAβircellscountandtheaverageopticaldensityofADratsinthehippocampusaged,opticaldensityofAChEpositivenervousfibersodelgroupparedodelgroup.ConclusionsMechanismoftanshinoneonimprovinglearningandmemoryimpairmentdementiamodelratsinducedbyDgalac
5、tosebinationightberelatedtodecreasingexpressionofAβinhippocampusandprotectingcholinergicnervesinbrain. 【Keyyloidpeptideprotein(Aβ);Acetylcholinesterase(AChE);Hippocampus 阿尔茨海默病(AD)〔1〕是严重影响老年人健康的常见病、多发病,在欧、美等国家已成为继心血管病、肿瘤及中风之后的第4位死亡原因。各种原因导致的中枢神经系统内β
6、淀粉样前体蛋白(APP)的过多表达,APP被降解导致过量的β淀粉样蛋白(Aβ)产生是启动AD发病的关键因素。Aβ是AD患者脑内老年斑的主要成分,凝聚态的Aβ具有神经毒性被认为是细胞凋亡过程的诱导因素〔2,3〕。AD患者表现出中枢胆碱能系统功能紊乱,神经递质乙酰胆碱(ACh)及其合成酶胆碱乙酰化酶(ChAc)缺失的程度与AD密切相关〔4〕。有报道,丹参酮ⅡA和ⅡB能减少小鼠短暂的(急性)局灶性脑缺血的脑梗死灶体积,并可能有神经保护作用〔5〕,还能改善缺血再灌注损伤小鼠和东莨菪碱(抗胆碱药)诱发
7、的空间行为缺陷小鼠的学习、记忆障碍〔6〕。但就丹参酮对D半乳糖Aβ140诱发复合痴呆(记忆障碍)病变大鼠的作用未见报道。本研究采用腹腔注射1.25%D半乳糖致衰老加双侧海马微量注射Aβ140诱发AD样痴呆(记忆障碍)大鼠模型,以观察海马内ACh的降解酶乙酰胆碱酯酶(AChE)和Aβ表达的变化,同时观察丹参酮改善大鼠学习记忆障碍的神经化学机制。 1材料与方法 1.1实验动物雄性SD大鼠45只,鼠龄3~4月,清洁二级,体重250g左右(华中科技大学同济医学院实验动物学部提供)。实验动物
8、随机分成3组:AD模型组15只;丹参酮治疗组20只;溶媒对照组10只。 1.2主要试剂及仪器Aβ140、DAB(Sigma公司,美国),AβSP免疫组织化学试剂盒(ZYMED公司,USA),生物素标记羊抗兔IgG工作液、辣根酶标记链霉卵白素(SA/HRP)工作液(北京中山生物有限公司),丹参酮(华中科技大学同济医学院临床药理学教研室惠赠)。江湾Ⅰ型脑立体定位仪(上海川沙花木农机厂),Y型水迷宫(中国医学科学院药物所研制),AO恒冷箱切片机(AO公司,美国),HPIAS1000彩色病理
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