丹参蛋白激酶smsnrk2.4的克隆及表达分析

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1、丹参蛋白激酶SmSnRK2.4的克隆及表达分析　　[摘要]蔗糖非酵解型蛋白激酶家族2（SnRK2）在逆境植物信号转导途径中起着重要作用。该研究根据丹参转录组数据从丹参cDNA中克隆得到一个SnRK2家族基因，命名为SmSnRK24，属于Ⅰ类SnRK2。SmSnRK24基因包含8个内含子，9个外显子，其开放阅读框1068bp，编码355个氨基酸，推测其蛋白相对分子质量为4063kDa，将其构建到原核表达载体pMALc2X上，原核诱导表达出与预测蛋白大小一致的目的蛋白。依据丹参基因组序列，PlantCARE分析SmSnRK2

2、4起始密码子ATG上游3000bp的启动子系列，结果显示该序列包含Ibox，GAmotif，HSE，LTR，TCrichrepeats等逆境胁迫响应元件，以及GAREmotif，Pbox，ABRE，CGTCAmotif等激素响应元件。实时荧光定量PCR分析表明SmSnRK24在丹参根中的含量较高，在茎中和叶中含量相当，ABA和PEG胁迫响应分析表明，SmSnRK24对PEG渗透胁迫响应显著，对ABA胁迫响应微弱。该研究为进一步探讨SmSnRK24基因在丹参干旱胁迫下次生代谢产物积累机制中的作用奠定了基础。　　[关键词]丹

3、参；SmSnRK24；原核表达；启动子；实时荧光定量PCR　　Cloningandexpressionanalysisofproteinkinase　　SmSnRK24fromSalviamiltiorrhiza　　JIAYanyan1，RUMei2，JINWeibo3，LIANGZongsuo1，3*　　（1CollegeofLifeScience，NorthwestAgricultureandForestryUniversity，Yangling712100，China；　　2InstituteofSoilandWa

4、terConservation，ChineseAcademyofSciencesandtheMinistryofWaterResources，Yangling712100，China；　　3CollegeofLifeScience，ZhejiangSciTechUniversity，Hangzhou310018，China）　　[Abstract]Sucrosenonfermenting1relatedproteinkinase2（SnRK2）playsakeyroleinabioticstresssignalingin

5、plantsInthisstudy，weclonedaSmSnRK24genebelongingtosubclassIofSnRK2fromSalviamiltiorrhizabyscreeningitstranscriptomedatabaseTheSmSnRK24genecontains8intronsand9exons，witha1068bpopenreadingframeencodingapolypeptideof355aminoacids，thepredictedmolecularmassofwhichis40

6、63kDaProkaryoticexpressionofSmSnRK24proteinusingpMALc2XastheexpressionvectordisplayedthattherecombinantproteinofSmSnRK24geneinEcoliwasconsistentwiththepredictedsizeA3000bppromotersequenceofSmSnRK24containedsomestressresponsiveelementsandhormoneresponsiveelementsQ

7、uantitativerealtimePCRanalysisrevealedthattheexpressionofSmSnRK24inrootwasmuchhigherthanthatinstemandleaf，SmSnRK24wasstronglyinducedbyPEGstress，weaklyinducedbyABAstressThisresearchprovidedabasisforfurtherstudyoftheSmSnRK24geneplayingtheroleinaccumulatemechanismof

8、secondarymetabolitesinSmiltiorrhizaunderdrought　　[Keywords]Salviamiltiorrhiza；SmSnRK24；prokaryoticexpression；promoter；quantitativerealtimePCR　　丹??，为唇形科鼠尾草属多年生草