丹参赤霉素合成与代谢相关基因家族的鉴定、分子克隆及表达分析

《丹参赤霉素合成与代谢相关基因家族的鉴定、分子克隆及表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、《碱如皆ｆ化中刘《巧＞博±研究生学位论文Ｗ北京协和医学院研究生院—中国輕学科学院约用牠物研究所２０１２级博±研究生杜淸丹參赤霉素合成与代谢相关基因家族的鉴定、分子克隆及表达分析学号；Ｂ２０１２００９００６学校代码；１００２３学号：博±学位论文丹参赤霉素合成与代谢相关基因家族的整定、分子克隆及表达分析Ｉｄｅｎｔｉ巧ｃａｔｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｓｉｓｏｆｅｎｅ，ｇｐｙｇｆａｍｉｌｉｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎ

2、Ｓａｌｖｉａｍｉｌｏｔｉｏｒｒｈｉｚａｇ所院：中閨跨学科学院巧用植物研究所．姓名：杜巧学号：Ｂ２０１２００９００６指导教师：卢善发研究巧导师小组：学科专业：生药学研究方向：药用巧物分乎生物学－－完成日期：２０１５５２７１中国臣学科学院药用植物研究所２０口级博±研究生杜清丹参赤霉素合成与代谢相关基因家族的鉴定、学号分子克隆及表达分析；Ｂ２０口００９００６独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加Ｗ禄注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表

3、或撰写过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：兴月日ｆＴ年（学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解北京协和医学院有关保存、使用学位论文的管理办法，。有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借阅。本人授权北京协和医学院可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）

4、学位论文作巧签名；清导师签名：和寺签字日期：；年＾月曰签字曰期年＾月日学位论文作巧毕业后去向：工作单位：化话：通讯地址：邮编：２中国医学科学院药用植物研究所２０１２级博±研究生杜清、学号丹参赤霉素合成与代谢相关基因家族的鉴定分子克隆及表达分析：Ｂ２０１２Ｑ０９００６摘要一赤霉素为种重要的植物生长激素，属于四环二荫类化合物，是稚类化合物生一ＭＥＰ－－（２Ｃ物合成途径的下游产物。赤霉素生物合成过程中，般先通过质体中－Ｄ－－４－甲基赤菊糖醇磯酸）途径合成中间产物ＧＧＰＰ（極牛儿基化牛儿基焦磯酸），一再在系列

5、酶的催化下，形成不同种类的赤霉素。细胞质和线粒体中合成ＧＧＰＰ的ＭＶＡ一（甲哲戊酸扣Ｍ过）途径在赤霉素生物合成过程中也有定作巧。本论文从丹参（／Ｂ－／ｍ７化ｗｉｂａｕｎｇｅ）全基因姐数据库中鉴定了内根贝壳杉婦氣化酶（Ｓ／ｗＫＯ）、贝壳－ｘ）－杉巧酸氧化酶（＆Ｗ必４０）、赤霉素２０氧化酶（ＳｍＧ＾２０ｏ、赤霉素３氧化酶－（疏Ｇ心ＯＪＣ）和赤霉素２氧化酶（加Ｇ心ＯＸ）等参与赤霉素合成与代谢相关的基因，基于ＰＣＲ技术对鉴定得到的基因进行了分子克隆，对ｃＤＮＡ和蛋白质的序列特性Ｗ及亚细胞定位进行了分析，构建了系统进化树，研究了它们在丹参根、茎、叶和花

6、等多组织中的表达，分析了古己焦磯酸合成酶口ｍＣ化）、内根壳杉猜合成酶－ｉＳｍＫＳＬ）、内根贝壳杉巧氧化酶（５＞？１必或、巧壳杉巧酸氧化酶（＆Ｗ心巧、赤霉素２０－３－氧化酶２－氧化酶乂赤霉素（讯和赤霉素氧化酶（疏Ｇ如ＯＸ）等基困对外源赤霉素ＧＡ３处理的响应情况。另外，对丹参赤霉素生物合成途径上游基因／０／》（足／／游／Ｄ／２）进行了克隆及转基因的初步分析。结果如下：（０基于丹参全基因组序列，通过同源比对，鉴定了１个讯嫩９、２个疏抑化６个加Ｇ４２０ｏ；ｃ、２个＆ＷＧ４３０ＪＣ和ｎ个疏Ｇ心ＯＪＣ基因；采用ＰＣＲ技术对所有鉴定出来的新基因进行了克

7、隆，获得全部２２个基因的开放读码框序列（ＯＲＦ）。（２）基于化物信息学分析了ｃＤＮＡ和推断的氨基酸序列的特征，结果表明２２ＯＲＦ长９３３－－１５５７ｂ之间５３８９４３之间个基因的度在ｐ，理论等电点在．．，推测的蛋白质长度在３１１和５１９氨基酸残基之间，偏酸、碱性氨基酸都有，分子量为３４－．３６５７．７３ＫＤａ。基于ＴａｒｇｅｔＰ巧测了２２个蛋白质的亚细胞定位，发现讯沁０、筑和奶沁４０２氨基酸序列的氮端含有分泌途径的信号化，可能定位于内质网；ＳｍＧ心０ｘ７和５＞ｗＧ４２ｏｘ５氨基酸序列的氮端含有叶绿体转运肋，可