非洲菊切花类受体蛋白激酶基因的克隆与表达分析

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1、硕士学位论文非洲菊切花类受体蛋白激酶基因的克隆与表达分析作者姓名王迪学科专业园林植物与观赏园艺指导教师程桂平副教授万小荣教授所在学院园艺园林学院论文提交曰期2015年5月学位论文原创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文版权使用授权书本人完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制

2、手段保存、汇编学位论文。同意学校将本人的学位论文提交清华大学中国学术期刊（光盘版）电子杂志社全文出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，传播学位论文的全部或部分内容。(保密的论文在解密后应遵守此规定）本学位论文属于：□保密，在__年解密后适用本授权书。$木保密,同意在校园网上发布，供校内师生和与学校有共享协议的单位浏览。(请在以上相应方框内打“V”）b*>°CloningandExpressionAnalysisofGeneEncodingReceptor-LikeProteinKinaseGenefromincutGerberajamesoniiADissertationSubmit

3、tedfortheDegreeofMasterCandidate：WangDiSupervisor：AssociateProfessorChengGuipingProfessorWanXiaorongZhongkaiUniversityofAgricultureandEngineeringGuangzhou,China分类号：S68学校代码：11347学号：20122090706006仲恺农业工程学院硕士学位论文非洲菊切花类受体蛋白激酶基因的克隆与表达分析作者姓名：王迪指导教师姓名、职称：程桂平副教授、万小荣教授学科专业名称：园林植物与观赏园艺研究方向：观赏植物生物学论文提交日期：20

4、15年05月日论文答辩日期：2015年05月29日学位授予单位：仲恺农业工程学院学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：苏志尧委员：刘军、梁红、何生根、张伟丽摘要非洲菊（GerberajamesoniiBolus）现已成为继世界四大切花后的第五大切花。但是，非洲菊切花采后易出现花瓣失水萎蔫、褪色、脱落、弯茎等现象，从而丧失观赏价值和商品价值。类受体蛋白激酶（receptor-likekinases，RLKs）是植物许多信号转导途径中的关键组分。本研究以非洲菊‘Crossfire’品种为试材，首次从舌状花中克隆到1个类受体蛋白激酶基因GjRLK1，分析了其表达的组织器官特异性，检测了其

5、在非洲菊切花瓶插过程中的表达变化，并分析了低温、黑暗和细胞分裂素对其表达的影响，主要结果如下：1、采用RT-PCR和RACE方法从非洲菊中克隆到了1个RLK基因（GjRLK1）。所获得的GjRLK1基因cDNA长为2486bp，包括2157bp的开放阅读框（ORF），共编码719个氨基酸。经BLASTp分析表明，GjRLK1序列属于典型的富含亮氨酸重复的RLKs家族（LRR-RLKs），具有一个含10次重复的LRR基序的胞外受体结构域、一个跨膜结构域和一个胞内丝氨酸/苏氨酸激酶结构域。多重序列比对分析发现GjRLK1与可可TcRLK、黄麻CcRLK、拟南芥AtRLK(At1g09970

6、)和苜蓿MtRLK的氨基酸序列同源性分别为73%、71%、67%和63%。2、采用实时荧光定量扩增的方法（q-PCR）分析了非洲菊GjRLK1基因表达的组织特异性和采后低温处理对其表达的影响，结果表明：（1）GjRLK1基因在非洲菊的舌状花、管状花、萼片、叶片和根中均有表达，且在舌状花和花萼中的相对表达量较高。（2）非洲菊切花瓶插过程中GjRLK1基因的表达呈先缓慢下降再迅速上升的趋势；在甁插第18d，其相对表达量最高，达到第0d的3.03倍。说明非洲菊切花衰老可能促进其中GjRLK1基因的表达。（3）低温（4℃处理24h）可促进非洲菊切花中GjRLK1基因的表达，切花瓶插期缩短。3、

7、研究细胞分裂素和黑暗处理对非洲菊切花瓶插期GjRLK1基因表达以及切花衰老的影响，结果表明：（1）黑暗处理可加速非洲菊切花的衰老，上调GjRLK1基因的表达。（2）6-BA处理可延缓非洲菊切花的衰老，下调GjRLK1基因的表达。细胞分裂素可能通过降低GjRLK1基因的表达而延缓非洲菊切花衰老，暗处理则可能通过增强GjRLK1基因的表达而加速非洲菊切花衰老进程。关键词：非洲菊；切花；类受体蛋白激酶；基因克隆；表达分析IAbstractGerber