乳酸测定SOP_LA临床意义_检验科生化项目SOP

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1、乳酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理乳酸测试方法是对Marbach和Weil方法的改进1，该方法把乳酸盐氧化生成丙酮酸盐。兔子肌肉中的乳酸脱氢酶(LDH)能催化L-乳酸盐的氧化，生成丙酮酸盐，同时使烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)还原，NADH的吸光度变化率与乳酸盐的浓度直接成正比。乳酸脱氢酶试剂盒L-乳酸盐+NAD+丙酮酸盐+NADH+H+肼被用于捕捉生成的丙酮酸盐（是一种腙），从而驱使反应完成。2标本采集与处理2.1采血方法静脉采血2ml，氟化钠抗凝。2.2标本保存空腹采血后立即冷却，在15分钟之内分离血细胞，把样本始终放在冰上并迅速分析。如果不

2、能立即完成测试，应把样本冷藏起来，但最久不得超过24小时，或冷冻起来，但最久不得超过1个月。2.3注意事项抽血应在安静状态，注意勿使局部血液瘀积，抽血时不用止血带，也不要让患者用力握拳。如用止血带，则应在静脉穿刺后，除去止血带2min后再抽血。重度溶血的样本，由于在红细胞中存在乳酸，会导致乳酸浓度偏高。不推荐使用肝素化血浆，在采血管中如果没有抗糖分解剂，会得到偏高的测试结果。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~2孔为NAD，浓度为2.0uM，片剂；3~4孔为二腙硫酸盐，浓度为3.7uM，液体；5~

3、6孔为LDH，浓度为40U，液体；7~8为三羟甲基氨基甲烷缓冲液，浓度为0.24mM，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品乳酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页自制质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。4

4、.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行

5、仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min,即可使用。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目

6、键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator乳酸测定文件编号：版本号：页码：第页共页Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品-30℃可保存1年，未开启-20℃可保存30d,取出融化至室温后可直接使用

7、。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0.3~15mmol/L,对于超过测定线性范围的结果，用净化水对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间静脉血浆：0.4~2.0mmol/L脑脊液：0.6~2.2mmol/L9临床意义组织严重缺氧可导致三羧酸循环中丙酮酸需氧氧化的障碍，丙酮酸还原成乳酸的酵解作用增强，血中乳酸与丙酮酸比值增高及乳酸增加，甚至高达25mmol/L。这种极值的出现的出

8、现标志着细胞氧化过程的恶