血氨测定SOP_AMON临床意义_检验科生化项目SOP

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1、血氨测定文件编号:版本号:页码:第页共页1检测原理谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化氨和α-酮戊二酸(α-KG)的缩合反应,同时氧化还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)。由于NADPH的消失而导致的在340nm处的吸光度下降,与样本中血氨浓度成正比。GLDHNH4+α-KG+NADPHPH7.0丙酮酸盐+NADP+H2O2标本采集与处理2.1采血方法空腹肝素抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存空腹采血后立即至于冰水中,立即分离血浆,在20min内进行分析。2.3注意事项2.3.1血浆氨测定不能用血清标本,肝素(或EDTA、草酸盐)抗凝,注射器抽取后密封针头

2、,或放入提前准备的小瓶内加盖密封。2.3.2红细胞内氨浓度是血浆的2.8倍,溶血可使红细胞内的氨进入血浆,是测定结果偏高,故标本应禁止溶血。2.3.3实验用水、玻璃器材应做无氨处理,注意防止环境中氨的污染。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~3孔为NADPH0.25mM,α-KG4.67mM,激活剂,缓冲液,片剂;4~6孔为GLDH10.8U,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存,有效期内稳定。3.2质控品血氨测定文件编号:版本号:页码:第页共页自制质控品。3.

3、3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min,分离血清上机测定。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在PatientName处选择性输入病人名字,按enter,在Sam

4、pleNo处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXTMODE选择样品管类型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID选择标本类型)。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。5校准程

5、序5.1校准品准备和储存直接使用,2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator血氨测定文件编号:版本号:页码:第页共页Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个

6、水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGNCUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~1000umol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间静脉血浆:11~32umol/L9临床意义正常情况下,氨在肝脏内转变成尿素。严重肝脏疾病时,氨不能从循环中清除,引起血氨升高。血氨有神

7、经毒性,可引起肝性脑病(肝昏迷)。成人血浆氨的测定,主要用于肝昏迷的监测和处理。血浆氨的测定还可用于儿科Reye综合症的诊断。该综合症有严重低血糖、大块肝坏死、急性肝衰竭,并伴有肝脂肪变性,在肝酶谱增高之前即见血氨增高。此外,血氨对诊断某些先天性代谢紊乱,如鸟氨酸循环的氨基酸代谢缺陷(高血氨)也有一定价值。10参考文献[1]西门子医学诊断产品(上海)有限公司血氨(AMON)测定试剂说明书。[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:460.编写:审核:批准:

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