直接胆红素测定SOP_DBIL临床意义_检验科生化项目SOP

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1、直接胆红素测定文件编号:版本号:页码:第页共页1检测原理重氮化对氨基苯磺酸由亚硝酸钠和对氨基苯磺酸在低PH值时结合而形成。用0.05M的HCl稀释样本。先记下空白读书以消除非胆红素色素的干扰。加入重氮化对氨基苯磺酸,增溶的胆红素,结合的胆红素会转化为重氮胆红素,它是一种在540nm处吸光的红色发色团,使用双波长(540,700nm)终点法测量。使用了空白校正。结合胆红素+重氮化对氨基苯磺酸红色发色团(在540nm处吸收)2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存,及时送检。在2~8℃冷藏可稳定3天,-70℃暗处保存,稳定3个月。2.3注意事项推荐选用血清

2、并及时分离。标本应避免脂血、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船5孔为亚硝酸钠0.5%,液体;6孔为盐酸0.5M,液体;7~8孔为对氨基苯磺酸0.45%,盐酸1.09%,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存,有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。直接胆红素测定文件编号:版本号:页码:第页共页4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告

3、→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在PatientName处选择性输入病人名字,按enter,在SampleNo处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXTMODE选择样品管类型)、Prio

4、rity(按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID选择标本类型)。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸馏水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5

5、.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGNCUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存直接胆红素测定文件编号:

6、版本号:页码:第页共页质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期,未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~342umol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间0~5umol/L。9临床意义血清结合胆红素增高,见于肝内或肝外胆道阻塞、肝细胞损害(特别是疾病后期)、Dubin-Johns

7、on综合征和Rotor综合征等。10参考文献[1]西门子医学诊断产品(上海)有限公司直接胆红素(DBIL)测定试剂说明书。[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:452~454。编写:审核:批准:

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