乳酸脱氢酶测定SOP_LDH临床意义_检验科生化项目SOP

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1、乳酸脱氢酶测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理测定由L-乳酸盐生成丙酮酸盐的氧化反应，同时伴有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的还原，生成还原的NADH导致340nm波长的吸光率发生变化，这种变化与乳酸脱氢酶的活性成正比。L-乳酸盐+NAD+丙酮酸盐+NADH+H+2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存应及时送检，室温可保存7d,不可冷冻。2.3注意事项推荐选用血清。不应使用含有EDTA、氟化钠或草酸钾的采血管。标本应避免溶血、脂血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子

2、医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~6孔为NAD1.23umol/L，片剂；7孔为L-乳酸盐15.3umol/L，三羟甲基氨基甲烷缓冲液，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。乳酸脱氢酶测定文

3、件编号：版本号：页码：第页共页4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目

4、，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用，2~8℃

5、保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置

6、，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度乳酸脱氢酶测定文件编号：版本号：页码：第页共页每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修

7、改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~600U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间100~190U/L。9临床意义LDH在组织中的活性比血清中高得多，所以当少量组织坏死时，该酶即释放入血而使其在血液中的活性升高。测定此酶常用于心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。心肌梗塞病人发病48h后，血清LDH达到峰值，且增高持续时间可达10d。此外进行性肌萎缩、恶性肿瘤、肝炎、溶血性疾病等，LDH亦可增高。血清LDH活力测定可判断白血病的疗效和转归。恶性贫血患

8、者血清LDH总活力显著升高,其程度与贫血的程度成正比。经大量维生素B12治疗后,血清酶可迅速恢复正常。若治疗5d,血清酶活力降低,既可确定诊断,同时也说明药物剂量适当。10参考文献[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂说明书。[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：416~41