糖化血红蛋白测定SOP_HA1C临床意义_检验科生化项目SOP

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1、糖化血红蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理总血红蛋白测量：将全血样本加入第一个含有溶血剂的比色杯中。溶血剂使红细胞溶解，同时把释放出的血红蛋白转变为具有特征吸光度光谱的衍生物。从第一个比色杯中转移测定用量的溶解全血到第二个比色杯中，以405nm和700nm光测量总血红蛋白浓度。全血+溶血剂释放血红蛋白血红蛋白衍生物（450nm光测量）糖化血红蛋白测量：测量了总血红蛋白的第二比色杯中的溶解全血还可用于测量HbA1c。第二个比色杯中的缓冲试剂里含有抗HbA1c抗体。糖化血红蛋白与抗HbA1c抗体发生反应，形成可溶性抗原抗体复合物。将一种含有多个HbA1c表位的多聚半抗

2、原试剂加入到第二个比色杯中。多聚半抗原与剩余（游离）抗HbA1c抗体反应，形成不可溶的抗体-多聚半抗原复合物。在340nm光下通过比浊法和在700nm光下空白对照测量的反应速率，与样本中的HbA1c的浓度成反比。糖化血红蛋白+抗HbA1c抗体糖化血红蛋白-抗HbA1c抗体抗体复合物抗HbA1c抗体（剩余）+多聚半抗原抗体/多聚半抗原复合物（在340nm有吸收）2标本采集与处理2.1采血方法采EDTA或肝素抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存标本在2~8℃可稳定7天。2.3注意事项标本应尽量避免溶血。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.

3、1试剂组成试剂船1~2孔为抗体≥0.5mg/mL，MESb缓冲液0.025M，TRISc缓冲液0.015M，pH6.2稳定剂，液体；3孔为多聚半抗原试剂≥8μg/mL，MESb缓冲液0.025M，TRISc缓冲液0.015M，pH6.2稳定剂，液体；3孔是空的；5~6孔为TTABd（溶血剂）<1%，液体。3.1.2试剂准备直接使用。糖化血红蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD多项免疫类质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生

4、化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8℃的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组

5、合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min,即可使

6、用。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准糖化血红蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIG

7、NCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存至有效期，未开启2-8℃可保存90d,开启后2-8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范