人绒毛膜促性腺激素测定SOP_HCG临床意义_检验科生化项目SOP

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1、人绒毛膜促性腺激素测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理HCG检测方法是根据“夹心”原理建立的两步法酶免疫分析法。样本与包被hCGα-亚单位特异性单克隆抗体的二氧化铬颗粒孵育，颗粒磁化分离，除去上清液。第二步，颗粒/hCG复合物与共轭试剂（β-半乳糖苷酶标记的特异性hCGβ-亚单位的单克隆抗体））孵育形成颗粒/hCG/共轭物夹心。磁化分离未结合的共轭物，洗涤。夹心结合的β-半乳糖苷酶与发色底物氯酚红-β-半乳糖苷酯（CPRG）结合，催化底物水解形成氯酚红（CPR）。病人样本中hCG的浓度与因CPR形成而引起的在577/700nm测定的

2、颜色变化成正比。hCG+CrO2-AbCrO2-Ab-hCG+CrO2-AbCrO2-Ab-hCG+CrO2-AbCrO2-Ab-hCG-F(ab′)2-β-gal+CrO2-Ab+F(ab′)2-β-半乳糖苷酶+F(ab′)2-β-半乳糖苷酶CrO2-Ab-hCG-F(ab′)2-β-gal+洗涤CrO2-Ab-hCG-F(ab′)2-β-gal+CrO2-Ab+F(ab′)2-β-半乳糖苷酶CrO2-Ab（转移到比色管）CPRG（在577nm处不吸收）CrO2-Ab-hCG-F(ab′)2-β-galCPR（在577nm处吸收）2标本采集

3、与处理2.1采血方法不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。在2-8℃下可冷藏保存48h，若不在48h内检测样品，应将样品在–20℃下冷冻保存。只能冷冻样品一次，并在样品融化后充分混匀。2.3注意事项推荐选用血清。收集的血液中存在草酸盐可引起铬颗粒聚集，不应使用。抗凝剂不足的冷冻血浆样本可能引起个颗粒聚集，不应使用。标本应避免严重脂血、溶血。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~2孔为hCGAb-β-半乳糖苷酶，液体；3~4孔为抗体-CrO20.75mg/

4、ml，片剂；4~6孔为CPRG23.6mM，片剂；7孔为底物稀释液缓冲液175mM，液体；8孔为铬稀释缓冲液105mM，液人绒毛膜促性腺激素测定文件编号：版本号：页码：第页共页体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3

5、标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8℃的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priori

6、ty（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存人绒毛膜促性腺激素测定文件编号：版本号：页码：第页共页直接使用，2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件

7、或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN

8、→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2