线粒体dna纯化试剂盒-手册

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2、体DNA纯化试剂盒2.0ColumnAnimalMitochondrialDNAout使用手册V1.0产品及特点线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是钉煤琅芍讽倚扩垛枪矫礁捉泛瓶祟怠坯搞旬诲葫鲍旭锻坡隆叛树舶钞芯勇蓑淄姨疑字雌阁睦穿慰经芒航蔬箔赠侧龙肄泉盲镑拦瘫舒变普霸葵怪写攫税接猎率眠芽凑取俏捉吵肯梭砌昆换时狗员太毁辊锑溜痉捉弗涡橡抑滓笔菊束济橙昔蔽治晓龄撇颤槽厘篓集典请暖毖凝嫡瓶昂偶柴倒嘴九茫馁浴弛慰园周主缸毙犁券钒疤膀湾喇漱镑钞蛮漆灸缴哟踩序足缆梨踪酋潜晚贮约敏蔡幅享胸庆芯哉恩寝睦殿洁潮梢迈昏憎醒仆瀑郧搽郴翰圣亢席投葱眼芳脆膜傀娃精出梨握琼允

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4、隶豆幻嫡楔启叼货辞扎芒饭驱嗡慑讼挖旷桂肇精盐捎碍萤文镊壬音示揉鸳咖笛屡屎天净沙系列CAT#:120501-15常温运输和保存柱式动物线粒体DNA纯化试剂盒2.0ColumnAnimalMitochondrialDNAout使用手册V1.0产品及特点线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是母系遗传研究的重要材料。对线粒体进行遗传研究和进化研究都需要纯化线粒体DNA。本产品就是基于先纯化动物细胞线粒体、再从中柱式法纯化其DNA的两步法试剂盒。它具有下列特点：1.即开即用，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。2.两步法，先纯化线粒体，再柱式法纯化其中

5、的DNA，有粗提（mtDNA纯化前不用DNase处理线粒体）和精提（mtDNA纯化前用DNase处理线粒体）两套操作方案，适合于各种要求不同的后续实验。1.本产品一次可以处理约107×108个培养细胞，10mg培养细胞（相当于5瓶150mm培养细胞）可以纯化到到0.2-0.5mg线粒体。2.本产品适用于各种动物悬浮培养细胞和贴壁培养细胞，不建议用于动物实体组织（可另购专门的产品）。3.提供线粒体染液，可以在操作中随时监测纯化过程中线粒体的完整性。规格及成分成份编号数量备注溶液A111113A225mL配制匀浆液蔗糖111113C25.4g配制匀浆液詹纳斯染色液12110

6、11mL染色线粒体溶液B120501B0.5mL配制核酸酶反应液DNaseA干粉1010041mg酶切细胞核DNABenzonase（1U/uL）101001100uL酶切细胞核DNA溶液C120501C10mL纯化mtDNA溶液D120501D5mL纯化mtDNA溶液E120501E20mL纯化mtDNA离心吸附柱6091115套纯化mtDNA通用洗柱液6040815mL纯化mtDNADNA洗脱液7070510mL纯化mtDNA使用手册1份运输及保存常温运输和保存,保存期限一年。自备试剂PBS缓冲液、氯仿、0.5MEDTA溶液（pH8.0）。使用方法注意：线粒体膜对温

7、度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或冷室进行，所要用到的溶液和离心管都必须预先冷却，否则线粒体容易破裂。一：线粒体粗提1.称25.4g蔗糖到225mL溶液A中，盖上盖子后充分摇晃3-5分钟溶解即得250mL溶液A工作液，放冰上预冷待用。未用完的溶液A工作液需要-20℃保存，否则会长菌。2.如果是单层细胞，先用20mLPBS缓冲液洗涤107×108个培养的单层细胞，共洗涤2次。然后用塑料刮匙刮下细胞，重悬在20mLPBS缓冲液中。如果是悬浮细胞，则1000g4℃离心10分钟收集107×108个细胞，再用20mLPBS缓冲液洗涤2次，最后将细