高效液相色谱法测定抱茎苦荬菜中木樨草素及芹菜素的含量

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1、高效液相色谱法测定抱茎苦荬菜中木樨草素及芹菜素的含量张晶佟全胜董金平田义新石磊岭【摘要】目的建立了同时测定抱茎苦荬菜中木樨草素和芹菜素含量的高效液相色谱（HPLC）方法。方法NucleosilC18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱，以甲醇-水（56∶44）为流动相；流速为1.0ml·min-1；检测波长为349nm；柱温为25℃。结果木樨草素在0.0344～0.172mg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系，R2=0.9993，平均回收率为98.23％，RSD为1.17％；芹菜素在0.01～0.16mg/ml范围内与峰面积呈良好线性关

2、系，R2=0.9993，平均回收率为97.16％，RSD为1.36％。结论此法简便快速，结果准确可靠、重复性好，可用于药材中木樨草素与芹菜素含量的同时测定。【关键词】高效液相色谱法抱茎苦荬菜木樨草素芹菜素　抱茎苦荬菜Ixerissonchifolia(Bge．)Hance为菊科(positae)苦荬菜属(Ixeris)植物，别名为苦碟子、满天星等，盛产于我国东北、华北等地。据《内蒙古中草药》记载，抱茎苦荬菜味苦、辛，具清热解毒、排毒、止痛之功效〔1〕。民间主要用于治疗阑尾炎、扁桃体炎、无名肿痛等症〔2〕。在以往的质量标准中只有测定腺苷的含量

3、，其中重要的有效成分黄酮类却没有准确可靠的含量测定方法〔2〕。抱茎苦荬菜中富含黄酮类化合物，木樨草素和芹菜素即为其中的代表性成分。据报道〔3〕，木樨草素是一种很具有代表性的天然黄酮，在植物界分布较广。其具有很强的抗氧化〔4〕、抗菌、抗病毒及降血压、降血脂作用〔5〕。芹菜素可抑制多种肿瘤的发生、发展，此外，还具有抗炎症、降血压、抗动脉硬化和血栓症、抗焦虑、抗菌、抗病毒以及抗氧化等多方面的生物学活性，而且其致畸变毒性与其他黄酮类化合物相比相对较低〔6〕。木樨草素和芹菜素均为抱茎苦荬菜中的主要成分，含量较高，但目前的研究只有针对其中某一种成分的含

4、量测定方法。彭缨等〔2〕采用RP-HPLC法对抱茎苦荬菜药材中木樨草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量进行了测定；程春萍等〔7〕采用反相高效液相法对中华苦荬菜中的木樨草素进行了含量测定。本文建立了HPLC法同时测定抱茎苦荬菜中木樨草素及芹菜素的含量的条件，以甲醇∶水（56∶44）为流动相，其中不加酸，选用的检测波长为349nm。并用此条件测定了不同采收期抱茎苦荬菜中木樨草素及芹菜素的含量。现报道如下。1仪器与药品岛津LC-2010高效液相色谱仪；SPD-10Avp紫外检测器；LC-Solution色谱工作站；紫外可见分光光度计（岛津2450

5、）；KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。木樨草素对照品购买于中国药品生物制品检定所，批号111520-200201；芹菜素对照品于实验室提供（纯度为98%以上）。甲醇为色谱纯（美国Fisher公司），水为纯水（经UPm×250mm,5μm）；流动相为甲醇-水（56∶44）；流速1.0ml·min-1；检测波长349nm；柱温25℃；进样量20μl。2.2对照品溶液的制备2.2.1木樨草素对照品溶液的制备精密称取木樨草素标准品8.6㎎，置于10ml的容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，制成0.86㎎/ml木樨草素对

6、照品溶液。2.2.2芹菜素对照品溶液的制备精密称取芹菜素标准品2.0mg，置于2ml的容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，制成1.00mg/ml芹菜素对照品溶液。2.3供试品溶液的制备精密称取样品粉末2.00g，置具塞三角瓶中，加90%乙醇50.0ml，超声提取30min/次，共提取3次，过滤，浓缩，用甲醇定容于10ml的容量瓶中，备用。2.4线性关系考察2.4.1木樨草素线性关系精密吸取“2.2.1”项制备的木樨草素对照品溶液0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml于5ml的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样20μl，

7、按“2.1”项色谱条件测定峰面积。以木樨草素进样量X为横坐标，峰面积Y为纵坐标制标准曲线，计算得回归方程为Y=3.00×107X-52458,R2=0.9993。结果表明木樨草素在0.0344～0.172mg/ml范围内与峰面积具有良好的线性关系。2.4.2芹菜素线性关系精密吸取“2.2.2”项制备的芹菜素对照品溶液50，100，200，400，800μl于5ml的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样20μl，按“2.1”项色谱条件测定峰面积。以芹菜素进样量X为横坐标，峰面积Y为纵坐标制标准曲线，计算得回归方程为Y=2.01×107X-

8、32617,R2=0.9993。结果表明芹菜素在0.01～0.16mg/ml范围内与峰面积具有良好的线性关系。2.5精密度实验在相同的“2.1”项色谱条件下，取同一采收期同一部位