不同酶法对猪皮中提取胶原蛋白的紫外线吸收对比分析

《不同酶法对猪皮中提取胶原蛋白的紫外线吸收对比分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第25卷，第6期光谱实验室Vo1．25，No．62008年11月ChinesefolohalofSpectroscopyLaboratoryNovember，2008不同酶法对猪皮中提取胶原蛋白的紫外线吸收对比分析①项智锋谢红兵(河南科技学院动物科学院河南省新乡市华兰大道453003)摘要为获得具有良好紫外线吸收能力的猪皮胶原蛋白水解物，应用于保养品中一种天然的防晒素材，以丰富价廉的猪皮为材料，获取胶原蛋白后．经不同温度预热．凤梨酶、木瓜酶、胃蛋白酶等进行不同时1司水解，结果显示，所得的水解液均对短波紫外绂吸收能力最佳，其次为中波紫外线，三者中以胃蛋白

2、酶组较佳，以0．5胶原蛋白经95C预热30min，再以1胃蛋白酶水解lh，可获得最佳紫外线吸收能力。关键词猪皮，胶原蛋白，紫外线。中图分类号：0657．32文献标识码：A文章编号：1004—8138(2008)06—12．49—051前言近年来地球的环境污染日趋严重，不仅臭氧层巳受到严重的破坏，造成了温室效应以及整个生态遭受极大的改变，而且紫外线到达地表的量正逐年增加，其中也包含了能量最强的短波紫外线，使得我们在生活中不时会受到过量的紫外线伤害，这将加速皮肤晒伤及老化，进而增加患皮肤癌的几率口]，因此防晒用品自然成为户外不可或缺的一项保养品。由于现今市

3、场上合成的防晒用品对皮肤大多较易产生不良的影响，所以寻求天然抗紫外线材料巳成为未来的趋势。胶原蛋白是一种普遍存在于动物体内的蛋白质，多年来研究发现猪皮胶原蛋白具有良好的保水性、膨润性、重组织化性与成膜性0]。在我国猪皮除了少部分作为皮革及明胶原料外，其余则因传统消费习惯而随着猪肉被切割贩卖，未能受到妥善的利用。目前国内关于使用猪皮胶原蛋白作为防晒素材的报道几乎为空白，本研究利用猪皮制成胶原蛋白粉末作为原材料，利用不同酶类将其水解，探讨不同反应时间对紫外线吸收的影响，旨在制成一种具有良好紫外线吸收能力的胶原蛋白水解物，以便作为保养或防晒产品中的天然吸收紫

4、外线材料。2实验方法2．1实验材料和实验仪器2．1．1原料购自新乡市市售背肩部至腰部的烫皮脱毛猪皮，除去皮下脂肪层，20—25C流水冲洗24h后备用。①河南科技学院人才引进资助项目【No．040123)②联系人．电话：(0373)30,10833：手机：(O)150373746,19；E—mail：zhifeng7809@yahoo．corn．cn作者简介：项智锋(1978～)．．湖北省武穴市人．Oi：~lti，主要从事畜牧兽医学科研究工作。If曼稿日期：2008—06—2,1；接受日期：2008—07—15光谱实验室第25巷2．1．2药品及仪器仪器：

5、UnicoUV一2000分光光度计(美国Dlemo公司)；YstralDriveX40／38均质粉碎机(德国Salimago公司)；HeidolphWB2000真空干燥箱(苏州长峰仪器厂)；pHS一3精密数显酸度计，电子天平等(苏州长峰仪器厂)。药品：木瓜酶(酶活力3．0U／rag，pH6．2)；凤梨酶(酶活力2．84U／mg，pH4．6)；胃蛋白酶(酶活力51U／rag，pH2．0)；以上酶产品均购自美国Sigma公司。2．2实验方法2．2．1猪皮胶原粉末的制备流程参照I．angmaier等方法加以改进。猪皮一修整一水冼一碱浸一水冼一去除表皮一修整一

6、盐水浸渍一L刃成粒状一水冼一脱水一丙酮脱脂一脱丙酮一水洗一乳酸浸渍一打浆一干燥一细磨一成粉2．2．2猪皮的酶处理称取0．1g猪皮胶原粉末，以蒸馏水定量至20mI为胶原蛋白溶液。配制9组该0．5胶原蛋白溶液，分成凤梨酶、木瓜酶及胃蛋白酶三个试验组，每一组又分3个不同水解时间。依下列流程处理：0．5胶原蛋白溶液一凤梨酶组、木瓜酶组、胃蛋白酶组一65C水浴中加热30min一一冷却至室温一调整酶解反应的pH值(凤梨酶4．6、木瓜酶6．2、胃蛋白酶2．0)一35C下水解60、120、180min一沸水浴3min破坏酶活性一滤纸过滤一测定波长250-400nm紫外

7、线吸光值。对照组不进行酶水解处理直接测定吸光值。2．3不同预热温度对酶解胶原蛋白在270nm波长吸光值的影响配制0．5胶原蛋白溶液后，以不同的加热温度65、80或95C处理30rain，以乳酸或氢氧化钠调整酶水解反应的最适合pH值后，每组添加1水解酶类，分别于35C下水解60、12O、180min，制成不同加热温度×不同水解时间3×3复因子设计。并测定波长275nm处紫外线吸光值。3结果与讨论’3．1胶原蛋白经不同酶水解后紫外线吸收能力比较3．1．1凤梨酶水解后胶原蛋白紫外线吸收分析经紫外光波长200-400nm检测其吸光值，发现经凤梨酶水解不同时间胶

8、原蛋白水解物对于波长200-280nm紫外线具有较佳的吸收能力，于紫外光短波长200-225n