杜仲总黄酮对成骨细胞增殖及ⅰ型胶原蛋白表达的影响

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1、西北药学杂志2011年8月第26卷第4期杜仲总黄酮对成骨细胞增殖及I型胶原蛋白表达的影响李三华，何志全。，陈全利。，凌锌，刘坤祥(1．遵义医学院中心实验室，贵州遵义563003；2．遵义医学院组胚教研室，贵州遵义563003；3．遵义医学院附属医院针灸科，贵州遵义563003)摘要：目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅骨体外培养成骨细胞的增殖及合成胶原蛋白的影响。方法杜仲总黄酮以质量浓度10，100，200和400g·mL分别加入从2d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中，用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响；采用激光共聚焦扫描显微镜检测I型

2、骨胶原蛋白的表达情况。结果与对照组比较，质量浓度1O～200p-g·ml_1的杜仲总黄酮能明显促进成骨细胞的增殖(P<0．05)，但并不能显著地促进成骨细胞合成I型胶原蛋白。结论杜仲总黄酮能直接促进体外成骨细胞的增殖。关键词：杜仲；黄酮；成骨细胞doi：10．3969／j．issn．1004—2407．2011．04．020中图分类号：R965文献标志码：A文章编号：1004—2407(2011)04—0272—03EffectsoftotalflavonoidsofEucommiabarkontheproliferationofr

3、atosteoblastandsynthesisofIcollagenprotein’LISanhua。HEZhiquan，CHENQuanli，LINGXin，LIUKunxiang(1．TheCentralLaboratoryofZunyiMedicalCollege，GuizhouZunyi563003，China；2．DepartmentofHistology＆EmbryologyofZunyiMedicalCollege，GuizhouZunyi563003，China；3．DepartmentofAcupuncturea

4、ndMoxibustionofAffiliatedHospitalofZunyiMedicalCollege-GuizhouZunyi563003，China)Abstract：0bjeetiveToinvestigatetheeffectsoftotalflavonoidsofEucommiabarkonproliferationofratosteoblastandsynthesisofcollagenprotein．MethodsTheosteoblastwasisolatedfromthecrinialboneofSpragu

5、~Dawleyratsatpostnatalday2。identifiedbyalkalinephosphatasestainingandculturedwith10，100。200and400／ag·mL～totalflavonoidsofEucommiabark．Theprolifer—ationofcellswasidentificatedbyELISAusingMTT，andthesynthesisofIcollagenproteinwasdetectedbyconfocallaserscan—ningmicroscopy．

6、ResultsThetotalflavonoidsofEucommiabarkattheconcentrationfrom10g·mI一to200,ug·mlim—provedevidentlythegrowthandproliferationofratosteoblastbutdidfthaveobviouspromotingeffecttothesynthesisofIcolla—genprotein．ConclusionTheflavonoidsofEucommiabarkareusefulforthesupportingof

7、bonethroughpromotingthequantityofosteoblasts．Keywords：Eucornmiabark；flavonoid；osteoblast杜仲为杜仲科植物杜仲(Eucommiaulmoides1．2材料和试剂杜仲总黄酮(totalflavonoidsofOliv．)的干燥树皮，为我国特有经济树种，是常用的Eucommiabark，TFE)由遵义医学院药学院惠赠，经滋补药材_1]，自古以来被我国中医作为补肾的药物在芦丁对照测定其质量分数为789／6；DMEM完全培养临床治疗中使用，尤其是在治疗骨质

8、疏松时与其他中基(含10新生牛血清、青霉素100u·mL、链霉药配伍使用；现也证实杜仲确有抗骨质疏松(OPS)作素100g·mL)为Gibco公司产品；新生牛血清购用口]。研究证明，杜仲中含有黄酮类、环烯醚萜类、木自杭州四季青生物工程