tgfβ2转染关节软骨细胞的实验研究

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1、·9#9·中华骨科杂志!""#年$月第!#卷第$期%&’()*)+,-&./，*012)!""#，3.14)!#，5.67$·基础研究·CDEF!%转染关节软骨细胞的实验研究王卫国娄思权佘华夏家辉)))【摘要】目的观察人关节软骨细胞在体外单层培养过程中的去分化，以及转染!"#$!%在关节软骨细胞内的表达和对去分化的抑制作用。方法从手术中切除的软骨组织中分离培养成人关节软骨细胞，通过脂质体介导的方法将已构建的/<=5>#6:?@ABCDEF!%转染到体外单层培养的软骨细胞中。采用&!$’(&、)*+,-、组织学染色、免疫组化和原位杂交的方法，分别对转染组和未转染组的第

2、.、/、0代细胞进行检测，比较目的基因表达、软骨细胞形态以及胶原和多糖生物合成的差异。结果经多次传代后，未转染软骨细胞在体外单层培养过程中逐渐走向去分化，CDEF!%、"型胶原和蛋白多糖聚糖体的表达逐渐减低，而#型胶原的表达增高。目的基因在转染组各代软骨细胞内均得到表达，转染后细胞保持软骨细胞的形态，"型胶原和蛋白多糖聚糖体表达虽有降低，但均高于未转染的同代细胞，而#型胶原表达增高的程度低于未转染细胞。结论人关节软骨细胞在体外单层培养中有去分化趋势；1234-56.G@AB!"#$!%真核表达载体转染人关节软骨细胞获得成功，在转染后关节软骨细胞内稳定表达，并对软骨细

3、胞的去分化有抑制作用。【关键词】转化生长因子!；转染；软骨细胞；关节H(&’I’-’.().J)KLK’JJL,L(-’M-’.().J)&0NM(OM,-’<01M,)<&.(K,.<2-LP)I2)-,M(PJL<-’.()Q’-&),L<.NI’(M(-)CDEF!)’()R’-,.)S>5D)SL’FT0.!U)V+W7X’FY0M(U7XZ[7Z0MU7L-7M167=L/M,-NL(-7.J7+,-&./MLK’IP

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