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1、柱前衍生高效液相色谱法测定贝类产品中氨基酸含量1882006,Vo1.27,No.07※柱前衍生高效液相色谱法测定贝类产品中氨基酸含量陈发河1,吴光斌1,陶金华z(1.集美大学生物工程学院,福建厦门361021:2.新疆农业大学食品科学学院,新疆乌鲁木齐830052)摘要:采用柱前衍生高效液相色谱法,测定了3种贝类中天冬氨酸,赖氨酸,亮氨酸等17种氨基酸含量.衍生试剂为6.氨基喹啉基.N.羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC),流动相为醋酸盐.磷酸盐缓冲溶液,乙睛,水,梯度洗脱.色谱柱为AccQ?Tag(Waters)氨基酸分析柱,紫外检测.结果显示,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性
2、关系,线性范围10~80mol/L,检出限为0.23mol/L,相关系数均在0.998以上,相对标准偏差RSD在2.1%～4,8%之间,回收率在91.3%～113.2%之间.关键词:高效液相色谱法;梯度洗脱;柱前衍生;氨基酸DeterminationofAminoAcidsinShellfishSamplesbyHighPerformanceLiquidChromatographywithPrecolumnDedvatizationCHENFa—he,WUGuang—bin,TAOJin—hua(1.CollegeofBio—Engineering,JimeiUniversi
3、ty,Xiamen361021,China;2.CollegeofFoodScience,XinjiangAgriculturalUniversity,Urumqi830052,China)Abstract:Thetechnologyofprecolumndcrivatization,alongwithhighperformanceliquidchromatographygradientelutionmethodwasusedindeterminingcontentsofaminoacidsinshellfishproducts.Ahigh-efficiencyAccQ?Ta
4、g(Waters)column,acetate-phosphatebuffer,acetonitrile,andtwicedistiUedwaterwerepreparedingradientelution.AQC(6?aminoquinoly?N?hydroxysuccinimidycarbamate).aderivationreagent,Wasusedforsamplederivatization.Conditionsofthetestwere:columntemperature37℃.wavelength248nmandflowrate1.Oml/min.Theres
5、ultsshowedthatconcentrationofaminoacidsandpeakareasachieveanicelinearrelations(rishigherthan0.998)withlinearrange10~80mol/L.RSDisof2.1%～4.8%.ThelimitofdetectionisO.23mol/L.Therangesofrecoveryofaminoacidsalefrom91.3%~113.2%.Keywords:highperformanceHquidchromatography(HPLC);gradientelution;pr
6、ecolumndefivatization;aminoacids中图分类号:0652.63文献标识码:A文章编号:1002.6630(2006)07.0188.04氨基酸是蛋白质的主要组成成分,食品中氨基酸的种类和含量是衡量其营养质量高低的一项重要指标.国内外早己将氨基酸自动分析仪专用于氨基酸的分析测定【1.21,氨基酸分析仪的工作原理是基于离子交换层析法,相比之下,高效液相色谱(HPLC)法因其具有分离度高,选择性好,可用于多种物质的分析等优点,近些年来已广泛应用于氨基酸的分析测定,随着研究工作的深入,柱前衍生结合HPLC法已成为氨基酸分离和分析的重要手段【】.由于大多数氨
7、基酸和胺类化合物缺乏天然的紫外或荧光吸收,进行化学衍生化是提高该类化合物检测灵敏度的一个有效途径.液相色谱分析方法简单,快速而且样品处理简单,衍生后可直接进样.目前采用柱前衍生结合HPLC法分析测定贝类中氨基酸种类和含量的研究报道尚少,本文采用反相高效液相色谱法,以6一氨基喹啉基.N.羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)作为柱前衍生试剂,对海湾扇贝,近江牡蛎和菲律宾蛤仔3种收稿日期:2005.09.28基金项目:厦门市科技计划项目(3502Z20031065)作者简介:陈发河(1960.),男,教授,研究方
