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时间:2018-08-01
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1、bFGF对人晶状体上皮细胞中FAK表达的影响作者:王欣玲 于韬 张国刚 阎启昌 张劲松【摘要】 目的:观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)引起体外培养的人晶状体上皮细胞迁移和黏着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)mRNA水平的动态变化。方法:体外培养的第3代人晶状体上皮细胞,建立细胞划痕损伤模型,经0,5,10,15μg/LbFGF作用8~16h后,电脑图像法测定细胞迁移距离,RT-PCR法检测0,1,4,8,16hFAKmRNA水
2、平,免疫荧光法检测整合素β1和增殖细胞核抗原表达阳性率的变化。结果:与对照组比,5μg/L组细胞迁移距离和FAKmRNA表达显著增加(P<0.05);10μg/L组细胞整合素β1表达阳性率显著增加(P<0.05);15μg/L细胞迁移距离和FAKmRNA显著降低(P<0.05)。结论:bFGF引起人晶状体上皮细胞迁移距离和FAKmRNA表达的变化。 【关键词】碱性成纤维细胞生长因子 上皮细胞 晶状体 黏着斑激酶 迁移 EffectofbFGFonexpressionfocaladhesionkinas
3、einhumanlensepithelialcells9AbstractAIM:Toobservetheeffectsofdifferentconcentrationbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)onhumanlensepithelialcellsmigrationandthedynamicchangesinfocaladhesionkinase(FAK)mRNAlevel.METHODS:Thescratchwoundmodelofthethirdpassagehumanlensep
4、ithelialcellswasestablishedandtreatedwithbFGFofdifferentconcentrations(0,5,10and15μg/L)for8-16hour.Theimagesofcellmigrationwerequantitativelymeasuredusingacomputer-assistedvideomicroscopicsystem.ThemRNAlevelofFAKwasmeasuredwithreversetranscriptase-polymerasechain
5、reaction(RT-PCR)assayat0,1,4,8and16hour.Thepositiveexpressionofintegrinβ1andproliferatingcellnuclearantigen(PCNA)werestudiedbyimmunofluorescentstaining.RESULTS:ThecellmigrationandFAKmRNAlevelweresignificantlystimulatedwhentreatedwithbFGFattheconcentrationsof5μg/L
6、comparedwiththecontrolgroup(P<0.05).Theintegrinβ1positiveexpressionratewassignificantlyincreasedwhentreatedwith10μg/LbFGF(P<0.05).ThecellmigrationandFAKmRNAlevelwassignificantlyinhibitedwhentreatedwith15μg/LbFGF(P<0.05).CONCLUSION:Thecellmigrationdistanc
7、eandFAKmRNAexpressionvarieswhenthecellsaretreatedwithdifferent9concentrationofbFGF.FAKplaysanimportantroleinhumanlensepithelialcellsmigration.·KEYWORDS:basicfibroblastgrowthfactor;epithelialcell;lens;focaladhesionkinase;migration 0引言黏着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK
8、)是细胞黏着依赖的信号转导(adhesion-dependentsignaltransduction)中的酪氨酸蛋白激酶,属于非受体蛋白酪氨酸激酶,在大多组织细胞中皆有表达,参与调节细胞发育、生长、存活、凋亡、黏附、骨架重组等过程,是生长因子受体信号转导通路中的重要信号分子[1,2]。碱性成纤维细胞生长因子(basi
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