1.8ghz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究

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1、浙江大学博士学位论文1.8GHz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究姓名：张一栋申请学位级别：博士专业：临床医学指导教师：姚克20120524浙江大学博士学位论文中文摘要1．8GHz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究浙江大学医学院眼科学博士研究生张一栋导师姚克教授中文摘要背景随着移动通讯设备的大面积普及引用，大众越来越关心生活环境中手机微波辐射可能产生的有害健康的效应．到目前为止，手机微波辐射对晶状体造成损伤的机制以及引发白内障病理过程是眼科学研究讨论的重点之一，也是争论的焦点。近几年手机微波

2、辐射所致蛋白组学改变引起人们的关注。以鸟枪法为代表的新兴蛋白质组学技术在生命科学研究中的广泛应用，使得人们从整体水平研究蛋白质组成和调控活动规律成为可能。如果能从人晶状体上皮细胞的蛋白质组谱中筛选出与微波辐照密切相关的标志性蛋白，将有助于深入研究手机微波辐射所致晶状体损伤的机制．目的探讨1．8GHz微波辐射对体外培养的人晶状体上皮细胞蛋白表达的影响．方法体外培养人晶状体上皮细胞(1lI尼Cs)置于sXc．1800细胞辐照系统(发射217Hz脉冲调制的1．8GHz微波)内连续辐照2小时，辐照组辐照强度(specifi

3、cabso印tion眦，SAR)为4W他g，假辐照为0W他g。辐照后立即提取全蛋白裂解液，经过溶液内酶解所得样本直接进入E牡aIl多维液相色谱系统进行分离，而后通过L1’Q—Orbi仃ap质谱仪进行质谱分析。运用化学计量法对质谱结果做相对定量分析，¨浙江大学博士学位论文中文摘要比较辐照前后蛋白质表达谱差异，筛选出微波辐照相关标志性蛋白。运用实时定量RPPcR技术在转录组水平进一步对质谱分析的结果进行筛选。人晶状体上皮细胞分别接受SAR分别为2，3，4w他g的1．8GHz手机频率微波连续辐照2小时，提取总蛋白后用w醅

4、tenlblot试验对上述筛选出的标志性蛋白进行验证。结果鸟枪法蛋白质谱比较分析提示4w侬g的微波辐射组与假辐照组之间人晶状体上皮细胞蛋白质表达谱存在差异。8个差异蛋白经过质谱分析和化学计量法统计，获得初步鉴定。实时定量RT．PcR结果显示VCP，usP35和SI冲68的倒[冰A表达辐照组与假辐照组之间有明显差异(P

5、组与假辐照组之间这3个蛋白的表达均无明显差异(P>O．05)。结论鸟枪法蛋白质谱分析是筛选人晶状体上皮细胞微波辐照相关差异蛋白表达的有效方法。微波辐射可导致人品状体上皮细胞蛋白质表达谱发生改变。经验证的3个蛋白中VcP和usP35可能参与了微波辐照所致人晶状体上皮细胞蛋白质表达质量控制过程，Sl冲68的改变提示微波辐照对蛋白分泌有影响。关键词：微波辐射；鸟枪法蛋白质组学；人晶状体上皮细胞；含缬酪肽蛋白；信号肽识别粒子68亚基；泛素特异性肽酶35IⅡ浙江大学博士学位论文英文摘要Eflfectsof1．8GHzMicr

6、owavesRadiationonProteinExDressioninHumanLensEpithelialCeUsEXDreSSlonlnHUmanLenSEplIneIlalIjeUSSchoolofmedicine，ZhejiangUniVe瑙i哆ophtalmologyM．D．CandidateYidongZhangSupeIVisorP1．o￡KeY-aoAbStractBackgroundThe、ⅣidespreaduseofmobileteleconlIIluIlicatioIlsh嬲arol塔ed

7、publicconcem晰tllpotentialhealtllrisks嬲sociated谢thexposuret0nlicrowaveele仃oma印砸cfields鱼)mtlleSeIloVelprodl】ctsofmobilephones．Agingis0neofnleIIlostcommoncauses硒rcatal陌Ict，butmaIlyotllerfactorsareinVolved．Microwaveele臼．0ma印etismmdiationh嬲beenregardasoneoftllemuch

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