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1、晶状体上皮细胞论文：热休克预处理对人晶状体上皮细胞HSP60mRNA表达的影响及意义【中文摘要】采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测人晶状体上皮细胞在不同环境刺激处理后HSP60mRNA的表达的变化,探讨HSP60mRNA表达变化规律以及不同环境刺激处理后表达是否有差异。方法采用正常人组织源性晶状体上皮细胞HUM-CELL-0098进行细胞传代培养后,将传代培养后的细胞进行分组实验,在氧化条件以及热休克处理后加氧化条件下培养细胞30min后,在正常培养条件下继续培养并且选取不同时间点(Oh、2h、4h、6h、16h、24h)的细胞采用SYBRGreen
2、I实时荧光定量PCR检测HSP60mRNA的表达情况。结果观察到晶状体上皮细胞在不同环境刺激下均表达HSP60mRNA,但热休克预处理后的细胞HSP60mRNA的表达较未热休克处理细胞高。氧化应激条件下HSP60mRNA的表达明显增加,在刺激结束后表达含量为最高,以后逐渐下降；在热休克预处理组中HSP60mRNA的表达含量也明显增加,但在4h表达量最高,以后逐渐下降。两组细胞在不同时段HSP60mRNA表达量变化趋势不同F=178.786,P=0.007,P<0.05,有统计学意义。此外,热休克预处理组与单纯氧化应激组中HSP60mRNA表达含量有显著差异,热休克处
3、理组的表达含量较单纯氧化应激组高,存在组间差别F=193.118,P=0.001,P<0.05,有统计学意义。时间与分表交互作用F=124.939,P=0.003,有统计学意义。两组细胞HSP60mRNA表达量进行各个时间两两对比发现这两组数据在统计学上有差异。此外,还发现热休克处理后的细胞表达HSP60mRNA可能具有时间依赖性。结论人晶状体上皮细胞在不同应激条件下,均能诱导HSP60mRNA的合成,但在不同应激条件下的HSP60mRNA的表达是具有差异的,热休克预处理后的细胞HSP60mRNA的表达高于氧化损伤处理的细胞,给予预先的热休克处理可通过提高HSP60
4、mRNA表达来保护晶状体。【英文摘要】AdoptSYBRGreenⅠreal-timequantitativepolymerasechainreaction(PCR)testingtoinvestigatetheexpressionofHSP60mRNAofhumanlensepithelialcellsindifferentenvironmentalstimuli,discussesthechangeruleofHSP60expressquantityandtheexpressionofHSP60mRNAindifferentenvironmentwhetheri
5、sdifferent.MethodsHumanlensepithelialcellsHUM-CELL-0098weretrainingandthendividedintogroups.LECswereexposedintheoxidationconditionsandhightemperatureaddoxidationconditionsduring30minandthenrecoveredtophysiologicalcondition.Atdifferentinterval(0hour,2hour,4hour,6hour,16hour,24hour),thes
6、egroupsweretestedbySYBRGreenⅠreal-timefluorescencequantitativepolymerasechainreaction(PCR).ResultsTheexpressionofHSP60wasexistedbothinthedifferentenvironment,butcellsthatinoxidativestressconditionHSP60mRNAexpressionlessthancellsinheatshockgroup.ThelevelofHSP60mRNAwasincreasedsoonaftero
7、xidativestresscondition,andthelevelat0hourishighest,thenexpressionleveldecreasedgraduallylater;Intheheatshockpretreatmentgroup,HSP60expressionwasalsosignificantlyincreased,butthehighestsummitat4hour,thentheexpressionlevelgraduallydeclining.ThevariationtrendofHSP60expressioninheatshoc
