as2o3诱导人卵巢癌细胞株ho8910凋亡和端粒酶活性的关系

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1、As2O3诱导人卵巢癌细胞株HO8910凋亡和端粒酶活性的关系作者：张少华，高尚风，郝志明，王英【摘要】目的探讨As2O3诱导HO8910细胞凋亡和端粒酶活性变化的关系。方法用不同浓度的As2O3溶液作用卵巢癌细胞株HO8910，于不同时间点收集细胞，MTT法检测细胞生长抑制率；FCM检测细胞凋亡率；TRAP-银染法观察端粒酶活性的变化。结果As2O3溶液对HO8910有生长抑制和诱导凋亡的作用，与药物浓度和作用时间相关。不同浓度As2O3作用HO8910细胞，其端粒酶活性在24h无明显改变，随着作用时间的延长，端粒酶活性逐渐下降，随着药物浓度的升高端粒酶活性也呈不断下降趋势，

2、以致消失。结论As2O3可以诱导卵巢癌细胞株HO8910发生凋亡，其机制可能不是通过端粒酶活性下降直接调控的，但端粒酶调控与凋亡调控有一定相关性。【关键词】三氧化二砷；人卵巢癌细胞；细胞凋亡；端粒酶活性　　ABSTRACT:ObjectiveToexploretherelationshipbetweenthevariationoftelomeraseactivityandapoptosisbyarsenictrioxideinovariancarcinomacelllineHO8910.MethodsWecollectedHO8910cellsat24h,48hand72hre

3、spectivelyunderdifferentconcentrationsofAs2O3.Theinhibitionratesofcells12weredeterminedbymethylthiazolyltetrazolium(MTT)assaytoevaluatetheeffectofAs2O3.Thepercentageofapoptosiswasdetectedbyflowcytometry(FCM).TelomeraseactivityofovariancarcinomacellswasdeterminedbythemethodofTRAP-PAGEargentat

4、ion.ResultsGrowthinhibitionandapoptosisinductionwereevokedbydifferentconcentrationsofAs2O3inHO8910cellsinatime-andconcentration-dependentmanner.Within24h,thetelomeraseactivityofHO8910cellshadnoobviouschangeindifferentconcentrationsofAs2O3.Thetelomeraseactivitygraduallydecreasedtillvanishedwi

5、ththeprolongationoftimeandincreaseofconcentrations.ConclusionAs2O3caninduceHO8910cellsapoptosis.Apoptosisinducedbyarsenictrioxidemaynotbedirectlyregulatedthroughthedecreaseoftelomeraseactivity.However,correlationexistsbetweentelomeraseandapoptosisregulation.　　KEYWORDS:arsenictrioxide;humanov

6、arianneoplasm;apoptosis;telomeraseactivity　　三氧化二砷(arsenictrioxide,12As2O3)是中药砒霜中提取的有效成份，已有实验研究表明As2O3具有抗肿瘤作用。端粒酶的激活对细胞的永生化起到非常重要的作用，抑制端粒酶的活性为临床抗肿瘤治疗提供了一条新思路。As2O3诱导的细胞凋亡与端粒酶活性之间是否存在某种联系，迄今报道不一。我们采用细胞培养、MTT法、流式细胞仪检测、TRAP-银染法等先进的技术，探索As2O3诱导卵巢癌细胞凋亡的机制以及细胞凋亡与端粒酶活性之间的关系。　　1材料与方法　　1.1材料与引物　　人卵巢浆液

7、性囊腺癌细胞株HO8910由第四军医大学妇产科实验室惠赠。人宫颈癌Hela细胞购自西安交通大学第一附属医院泌尿外科实验室，人胚肺成纤维细胞HFL-I购自中国科学院上海细胞所。As2O3为哈尔滨伊达药业公司产品，配制成15mmol/LAs2O3储存液，过滤除菌后，-20℃保存。使用前用含100mL/L胎牛血清的DMEM培养液稀释至工作浓度。DMEM培养基为美国GIBCO公司产品。AnnexinⅤ-FITC试剂盒购自晶美生物工程有限公司。CHAPS购于Sigma公司。TaqDNA多聚酶购于Pro