三氧化二砷与顺铂联合诱导人卵巢癌HO8910细胞凋亡的初步研究-论文.pdf

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1、·250·中国实用医药2013年2月第8卷第6期ChinaPracMed,Feb2013,Vo1.8,No.6·论著·三氧化二砷与顺铂联合诱导人卵巢癌H08910细胞凋亡的初步研究高洪泉张爱清田忠富【摘要】目的探讨三氧化二砷与顺铂联合对体外培养卵巢癌细胞株H08910细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡影响。方法用三氧化二砷与顺铂联合处理H08910细胞,采用MTI"法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解,以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化。结果在三氧化二砷与顺铂联合作用下,H08910细胞呈凋亡改变,D

2、NA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征。细胞凋亡的同时,细胞周期发生特定的改变。结论三氧化二砷与顺铂联合能抑制卵巢癌细胞增殖,能诱导卵巢癌细胞凋亡。【关键词】三氧化二砷(As0,);顺铂(DDP);细胞凋亡;卵巢癌细胞株StudiesonArsenictrioxideandCisplatininducesapoptosisinOvarianCancercelllinesHO8910GAOHong—quan,ZHANGAi—qing,T1ANZhor,!g,XiamenMedicalCollage157011,China【Abstract】ObjectiveThecur

3、rentstudywasdesignedtoinvestigatewhetherArsenictrioxideandCis.platincaninducesapoptosisinOvarianCancercel1.MethodsCellproliferationwasassessedbyMTFas—says.Morphologicalchangesofapoptosiswereobservedwithinve~microscope.DNAladderandcellcyclewereexaminedbyDNAagarosegeleletronphoresandPIf

4、luorescenceflowcytometry(FCM).ResultsUnderthein—fluenceofArsenictrioxideandCisplatin,H08910cellexhibitedchangesofapoptosisbothinmorphologyandinthecharacteristicsofelectrophoresis.Meanwhilethecellcyclealsoshowedspecialchange.ConclusionArsenictrioxideandCisplatincaninhibitcellproliferat

5、ion,ArsenictrioxideandCisplatincaninducesapoptosisinO—vanCancercel1.【Keywords】Arsenictrioxide;Cisplatin;apoptosis;OvarianCancercellline卵巢癌是是妇科恶性肿瘤中死亡率最高的肿瘤。众多研1.2.1细胞培养人卵巢癌细胞H08910培养于含有10%究表明肿瘤的发生发展不仅与细胞分化异常增殖过度有关,小牛血清,lOOU/ml青霉素、链霉素RPMI1640培养基中,在而且与细胞凋亡有关。随着人们对细胞凋亡机制的深入37℃、5%CO,培养箱内常

6、规传代培养。研究,发现许多化疗药物是通过诱导肿瘤细胞凋亡来发挥抗1.2.2MTT试验药物组为DDP浓度为4txmol/L,As2O3癌效应的。因此探索药物诱导肿瘤细胞凋亡,将成为肿瘤治浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0txmol/L共4组,用培养液稀疗的新方向。本文探讨三氧化二砷与顺铂联合对体外培养卵释,卵巢癌细胞以10/ml接种于4块进口96孑L培养板,每孔巢癌细胞株HO8910细胞凋亡的作用。加200培养液,每天用一块。每组设4个复孔,接种后241材料和方法h更换培养液。实验组加入各浓度药物培养液,对照不加药,1.1材料及仪器人卵巢癌细胞系HO8910购

7、自中国科学空白对照不加培养液,加药后分别于24、48、72、96h加入2O院上海细胞生物研究所。三氧化二砷购自哈医大第一附属医~IMTY,继续放入培养箱孵育4h后吸出培养液,加入150Ixl院,顺铂购于锦州制药~厂。RPMI一1640培养基为美国Pro—DMSO震荡溶解10rain,空白对照调零,酶联仪检测,波长490mega公司生产。使用前加小牛血清至10%,青霉素,链霉素nm,测定各孔的吸光值。计算抑制率,抑制率=[(阴性对照至100U/ml。流式细胞仪(FCM)为美国Coulter公司生产。组OD值.实验组OD值)/阴性对照组OD值]×100%。碘化丙啶(P

8、1)为美国

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