三氧化二砷诱导肝癌细胞自噬与凋亡的机制研究

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1、密级：公开学号：０２１３０８１１２南《中度综爹硕女＃隹化Ａ馨Ｈ氧化二神诱导肝癌细胞自雜与调亡的机制研究研究生邓正亭指导教师李湧健所在专业中医学（本硕连读）所在学科中医内科学所在学院基础医学院毕业时间２０１５年０６月ＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｕｔｏｈａａｎｄａｏｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂＡｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅｉｎｐｇｙｐｐｙｈｅａ杜ｃｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｐＡ’ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｅｄｆｏｒ化６Ｍａｓｔｅｒ

2、ｓＤｅｇｒｅｅＣａｉｉｄｉｄａｔ；ｅ：ＤｅｎＺｈｅｎｔｉｎｇｇｇＡｄｖｉｓｅｒ：Ｐｒｏｆ．ＬｉＹｏｎｉａｎｇｊＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ＇■？？■学号：０２１３０８１１２硕±学位沦文Ｈ氧化二神诱导肝癌细胞自隧与调亡的机制硏究作者姓名邓正亭申请学位级别临床医学硕±学位指导教师姓名李湧健职称主任中医师学科专业中医内科学研究方向肿瘤病研究学习时间自２００８年０９月０１日起至２０１５年０６月３０曰止论文

3、提交日期２０１５年０６月０９日论文答辩日期２０１５年０５月３０曰学位授予单位南京中医药大学学位类型临床医学硕±学位原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中｜＾｜明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名＞裤占月Ｓ日４擎学位论文版权使用授巧书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同

4、意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中．医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。，在保密□＿＿年解密后造用本授权书。本学位论文属于不保＾＂”（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名＞许Ａ月日》＊．６导师（需亲笔）签名；輪＞年月ｊｒ南京中医药大学硕±学位论文目录Ｓ录ｉ摘要ｉｉｉＡｂｓｔｒａｃｔｖｉｉｊｐ户１１刖育一第部分Ｈ氧化二巧对

5、肝癌细胞体外作用的实验研究２１．实验材料２１．１细施株与药物２．１２±要试剂２１．３配制试剂３１４．仪器设备５２．实验方法６２．１细胞培养—６２．２ＭＴＴ法检测不同浓度Ａｓ２〇３对肝癌ＨｅｐＧ２细胞增殖的影喃７２．３倒置相差显微镜观察Ａｓ２〇３巧肝癌ＨｅｐＧｓ细胞形态变化的影响８２．４Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染径观察Ａｓ２〇３对肝癌ＨｅｐＧ２细胞巧亡的影响８２．５ＴＵＮＥＬ法检测Ａｓ〇３对肝癌Ｈ巧＆细胞调亡巧影响２８－２．６ＡｎｎｅｘｉｎＶＦ圧ＣＰＩ９／双染法检测

6、Ａｓ２〇３对肝癌扫巧仿细胞调亡的影响２．７透射电子显微镜观察Ａｓ２〇３对肝癌Ｈ巧Ｇ２细胞调亡和自隨的影响９２．８免疫黄光检測自隆蛋白ＬＣ３Ａ／Ｂ和Ｂｅｃｌｉｎ１的＾惰况１０２．９ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测Ａｓ２〇３对肝癌ＨｅｐＣ立细跑白磋和渭亡相关蛋白水平表达的影响１０３．统计学处理１２４．结果．１２４．１不同浓度Ａｓ２〇３对肝癌ＨｅｐＧ２细跑增殖的影喃１２４．２倒置相差显微镜观察Ａｓ２〇３对肝癌Ｈｅｐ伍细胞形态变化的影响１３４．３Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色观察Ａｓ２〇ＨｅＧ调亡形态变化的影

7、响１４３对肝癌ｐｚ细胞４．４ＴＵＮＥＬ法检测Ａｓ２〇３对肝癌Ｈｅｐ〇２细賄调亡的影晌＂４５Ｖ－ＨｅＧＡｎｎｅｘｉｎＦＩＦＣ／ＰＩ双染Ａｓ〇细胞调亡的彰响６．法检测２３对肝癌ｐｓ１４．６透射电子远微镜观察Ａｓ２〇３巧肝癌ＨｅｐＧｓ细距須亡巧自瞳的影响１６４．７免疫巧光检测肝癌ＨｅｐＧ２细施中ＬＣ３１的表达倩况１７Ａ／Ｂ巧Ｂａｆｅ４ｅＢｅ．．．．１．８Ｗｅｓｔｒｎｌｏｔ法检测Ａｓ２〇３对肝癌Ｈｐ货细跑旨庭和覇亡相关蛋白水平表达的影喃．．．．９５．小Ｓ２２第二部分Ｈ氯化二巧对肝癌细胞荷瘤裸鼠体巧作用巧实验研究２３