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时间:2018-07-10
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1、人骨髓间充质干细胞对同种异体调节性T细胞的影响及可能机制实验研究论文杨靖,王庆海,曾秋棠,毛晓波【摘要】本研究探讨人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)对同种异体CD4+CD25+调节T细胞的作用,进一步查明人骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞免疫调节作用的可能机制。从人骨髓中分离培养hMSC,通过免疫组织化学方法检测其表面标记并进行鉴定。从非亲缘供者健康人外周血中提取单个核细胞,在IL2作用下体外培养,实验组加入不同数量级hMSC(1×103.freelinu
2、te,CPM值),细胞因子TGFβ、IL10、IFNγ和IL12表达量的相关性。结果表明:hMSC能明显抑制T淋巴细胞增殖,且抑制作用与hMSC呈剂量依赖性;实验组各组CD4+CD25+T细胞亚群含量以及Foxp3相对表达水平均较对照组明显增加(p0.05),且实验组间比较差异仍具有统计学意义(p0.05);Foxp3表达水平、CD4+CD25+T细胞百分率与T淋巴细胞增殖水平呈明显负相关(p0.05),与TGFβ、IL10表达量呈明显正相关,而与IFNγ和IL12的表达无明显相关性。
3、结论:hMSC呈剂量依赖性抑制同种异体淋巴细胞增殖,其机制可能与hMSC通过分泌TGFβ、IL10促进CD4+CD25-T细胞向表达Foxp3的CD4+CD25+调节T细胞转化,进而发挥免疫抑制作用有关。【关键词】骨髓间质干细胞EffectofHumanBoneMarroalStemCellsonAllogeneicRegulatoryTCellsandItsPossibleMechamismAbstractThestudymuneregulatoryeffectsofhumanbonemarro
4、esenchymalstemcells(hMSCs)onFoxp3expressingCD4+CD25+regulatoryTcellsandtoexplorethemechanismofimmunemodulationbyhMSCs.HumanMSCsbonemarroorphology,andthephenotypesmunohistochemistry.Humanperipheralbloodmononuclearcells(hPBMNCs)anunrelateddonorinthepresen
5、ceofrhIL2.After5daysofcoculture,thepercentageofCD4+CD25+Tcellsetry.Tcellproliferationidineincorporationusingaliquidscintillationcounter.TheexpressionofFoxp3inCD4+CD25+Tcellserasechainreaction(RTPCR).Cytokines(TGFβ、IL12、IFNγ、IL10)concertrationsofc
6、ulturedsupernatantseasuredents,thepresenceofhMSCsanner.TheincreaseofpercentageofCD4+CD25+TcellsintheperipheralCD4+TcellphocytesRNA(Foxp3/βactin)inhMSCsgroupsRNAexpressionandthepercentageofCD4+CD25+Tcells.HoRNAexpressionandthepercentageofCD4+CD25+Tcells
7、.ItisconcludedthattheFoxp3expressingregulatoryTcellsmayplayanimportantroleintheimmuneregulatorybyhMSCs.ItsmechanismisrelatedtothatthehMSCsmediatedTGFβandIL10convertCD4+CD25-TcellsintoCD4+CD25+TregulatoryTcells,arroesenchymalstemcell;CD4+CD25+Tcell;Fo
8、xp3;immuneregulatory中国实验血液学杂志JExpHematol2007;15(4)人骨髓间充质干细胞对同种异体调节性T细胞的影响及可能机制实验研究骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,.freelanmesenchymalstemcells,hMSC)对表达Foxp3的CD4+CD25+调节性T细胞的影响及其发挥负性免疫调节作用的可能机制,为将骨髓间充质干细胞应用于临床提供实验证据。材料和方法骨髓骨髓来源者为我院门
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