肿瘤转移抑制基因kai1-cd82在顺铂作用下的卵巢癌细胞中表达的变化

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1、肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在顺铂作用下的卵巢癌细胞中表达的变化：韩秋峪陆晓媛闫洪超【摘要】目的研究顺铂（cDDP）作用下人卵巢上皮性癌细胞株3AO中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达的变化，初步探讨其作用机制。方法采用倒置显微镜观察cDDP作用后3AO细胞形态学的变化；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察cDDP对细胞增殖的影响；运用免疫细胞化学方法检测不同浓度cDDP(1、3、9mg/L3个浓度组)作用的3AO细胞株中KAI1/CD82表达情况,并与细胞对照组（未经药物处理）进行比较。结果cDDP作用后细胞体积缩小、细胞内颗粒增多，细胞核固缩、深染，细胞凋亡；cDDP对3AO

2、细胞的生长抑制作用呈明显的剂量依赖关系；cDDP作用后卵巢癌细胞中KAI1/CD82基因的表达较对照组明显增强。结论cDDP不仅能增加对卵巢癌细胞的生长抑制率，而且能上调卵巢癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达，为临床上药物抑制肿瘤转移的深入研究提供了有利的实验依据。【关键词】卵巢肿瘤；肿瘤转移抑制基因；KAI1/CD82；卵巢上皮性癌细胞3AO；顺铂Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofcisplatin(cDDP)onvariationsoftheexpressionofmetastasissuppressorgeneKAI

3、1/CD82inhumanovarianepithelialcancercellline3AOandtomakeapreliminarystudyofthemechanismofcDDP.MethodsFolloinistration,the3AOcellsorphologicallybyinvertedmicroscopy.Methylthiazolyltetrazolium(MTT)assayployedtoobservetheeffectsoncellularproliferation.Ag/L,3mg/Land9mg/L)munocytochemistry(ICH)andtom

4、akeparisonsberincreased,resultinginnuclearpyosis,deep-stainingandcellapoptosis.MTTassaydemonstratedthatcDDPcouldpartiallyinhibitthegroarkeddose-dependenttendency.TheKAI1/CD82proteinexpressionindifferent3AOcellstreatedanovariancancercellline，butalsocouldeffectivelyup-regulateKAI1/CD82expressionin

5、humanovariancancercellline,entalevidenceforclinicalchemotherapyfortumormetastasis.Keys;tumormetastasissuppressorgene;KAI1/CD82;ovariancancercellline3AO;cisplatin卵巢上皮性癌在所有的妇科恶性肿瘤中具有较高的病死率，其5年生存率始终徘徊在30%左右，而局部浸润和转移则是导致患者死亡的主要原因。我们在研究中发现肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在卵巢上皮性癌中的表达与肿瘤的临床分期、肿瘤分化、转移、癌性腹水密切相关，并且KAI1/C

6、D82基因表达下调是肿瘤发生侵袭转移的危险因素之一［1］。因此，在此基础上，我们期望通过分析能够激活KAI1基因表达的特异性抗肿瘤药物，为临床上药物治疗肿瘤转移提供理论依据。顺铂（cisplatin，cDDP）自从问世以来已成为卵巢癌化疗的核心药物，其化疗效果广泛得到公认，但对其在抑制肿瘤转移方面的研究目前尚鲜见报道。本研究通过观察cDDP对卵巢上皮性癌细胞株3AO中肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响，进而对KAI1基因的激活途径、作用机制作初步探讨。1材料和方法1.1材料1.1.1细胞株人卵巢黏液性囊腺癌细胞株3AO购自ATCC(TheAmericanTypeCultureColle

7、ction），由徐州医学院附属医院中心实验室冻存。细胞复苏后培养于含10%新生小牛血清、100kU/L青霉素、100kU/L链霉素的RPMI-1640培养液中，在37℃、5%CO2培养箱中培养并传代。1.1.2试剂RPMI-1640细胞培养基为GibcoBRL公司产品。二甲基亚砜（DMSO）及四甲基偶氮唑蓝（MTT）为Sigma公司产品。新生小牛血清为杭州四季青公司产品，使用前经56℃灭活30min，置于-20℃冰箱内保存备用。cDDP注射液为