浒苔水溶性多糖的组成及其生物活性研究论文

《浒苔水溶性多糖的组成及其生物活性研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浒苔水溶性多糖的组成及其生物活性研究论文宋雪原，郭秀春，周文辉，温永红，朱春玲，杨黄浩【摘要】目的研究浒苔水溶性多糖的分离提取、组成及生物活性。方法经水煮、醇析、真空干燥得到浒苔粗多糖，由苯酚-硫酸比色法测定其中水溶性多糖含量;用气相色谱-质谱法和红外光谱对其化学成分进行分析。以抗坏血酸作为对照品，同时采用生物化学法测定了浒苔多糖对羟基自由基和超氧阴离子等自由基的清除能力。结果浒苔粗多糖提取率为10.25%.freelenteromorphaprolifera.MethodsCrudepolysaccharidefromenteromorphaproliferainedbyphenol-

2、vitrioliccolorimetry.Thechemicalpositionsoftheproductinedbythegaschromatography-massspectrometricandinfraredspectrum.Meaneasuredbybiochemicalmethodainponentsofthecudepolysaccharideenteromorphaproliferaissulfatedheteropolysaccharide，anditsbiologicalactivityissignificant.Keyorphaprolifera;Sulfatedp

3、olysaccharides;Biologicalactivity;Gaschromatography-massspectrometry浒苔俗称苔条、青海苔等，是一种大型绿藻，为绿藻门石莼目石莼科浒苔属的藻类植物。作为近海滩涂中的天然野生绿藻，其自然繁殖能力特别强，产量巨大1。我国海域浒苔资源十分丰富，很受人们欢迎，条浒苔(浒苔一种)是沿海人民常采持食用或用作饲料的藻类。浒苔富含叶绿素、碳水化合物、蛋白质、膳食纤维、矿物质、维生素和脂肪，能量却很低，是一种不可多得的天然理想营养食品原料1，2。海藻水溶性多糖的主要成分是硫酸多糖。硫酸多糖是多糖分子链中单糖分子的部分羟基被硫酸根取代而形成的

4、一类多功能活性物质，可以通过物理化学方法从海藻中提取出来3。海藻硫酸多糖糖基单体及硫酸基的位置和其来源密切相关。研究表明，硫酸多糖水溶性好，具有显著的抗肿瘤病毒、降血脂、降血糖以及增强机体免疫机能等生物学活性，已成为研究的热点4，5。本研究以青岛奥帆赛前爆发的大面积浒苔为原料，从中提取了水溶性粗多糖，并研究了浒苔水溶性多糖的组成及抗氧化活性，为我们进一步开发利用浒苔提供理论依据。1仪器与材料1.1仪器UNICO2000可见分光光度计(上海肯强仪器有限公司);KQ-400KDE型高功率数控超声波仪(昆山市超声仪器有限公司);R201型旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);FA1104型电子天

5、平(上海精天电子仪器厂);THZ-8恒温水浴锅(中国浙江嘉兴电热仪器厂);milli-Q(18.2MΩ·cm)超纯水处理系统(美国Millipore公司);Agilent5793I-6890气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)。1.2材料乙醇、葡萄糖、苯酚、硫酸、邻二氮菲、邻苯三酚、抗坏血酸(Vc)、乙酸酐、吡啶均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司;三氟乙酸(Tri-fluoroaceticacid，TFA)和正己烷为色谱纯，购自Dima公司;新配制的pH=7.4磷酸缓冲溶液和pH=8.2Tris-HCl缓冲液;水为自制Milli-Q超纯水(电阻率大于18MΩ·cm)。2方法2.1浒苔

6、采集及前处理实验中，浒苔采自青岛石老人海水浴场，洗净泥沙及其它杂质，自然阴干，粉碎至长度小于1cm。2.2浒苔粗多糖的提取6，7精确取浒苔样品5g，100ml95%乙醇回流提取2h，过滤，重复3次，除去小分子物质。滤渣用水冲洗若干遍，直到滤液与苯酚-硫酸反应基本为无色。以浒苔滤渣与水的质量比为1∶50加入0.05mol/L的稀盐酸水溶液，回流提取2h，过滤，滤渣重复提取3次。合并滤液，浓缩至液体微黏，加入3倍体积的无水乙醇，4°C静置过夜，离心(3000r/min)。沉淀依次用85%和95%无水乙醇及乙醚脱水，P2O5真空干燥过夜，得粗多糖EP512.5mg。2.3浒苔硫酸多糖的分析2.

7、3.1总糖分析8配制50μg/ml葡萄糖标准液，精确吸取此溶液0.00，0.40，0.80，1.20，1.60，2.00ml分别置于10ml容量瓶中。补加超纯水至4.00ml，加入1.00ml5%苯酚摇匀，再迅速加入5.00ml浓硫酸，摇匀冷至室温，于490nm处测定吸光度A，绘制葡萄糖标准工作曲线。准确称取5.0mg粗多糖，溶解过滤并定容至100ml。取2.00ml该溶液，按上述方法测定A值，然后根据公式，计算出样品浓度，求得粗糖