浒苔多糖的结构及寡糖研究

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1、中国海洋大学博士学位论文浒苔多糖的结构及寡糖研究姓名:齐晓辉申请学位级别:博士专业:药物化学指导教师:毛文君20120602浒苔多糖的结构及寡糖研究摘要浒苔是浒苔属绿藻的总称,在分类学上属于绿藻石莼目、石莼科,是我国沿海常见海藻,其作为食用和药用藻类有着悠久的历史。本文以青岛沿海春季和秋季的缘管浒苔、青岛沿海绿潮浒苔以及厦门沿海的条浒苔为原料,采用冷水提取和热水提取方法,分别对四种不同浒苔中的多糖进行了提取,并采用各种色谱分离技术对多糖进行分离纯化,运用化学和现代波谱方法对多糖的结构进行研究;采用酸降解法对多糖进行降解得到不同聚合度的寡糖,并对寡糖的结构进行了研究。

2、主要研究结果如下:1.青岛沿海两种缘管浒苔(至汤把加聊D印加,西钇a)藻体粉末分别经冷水和热水提取得到四种多糖MC、MH、SC和SH,其得率分别为12.4%、15.O%、14.O和12.3%。采用离子交换色谱法和凝聚渗透色谱法对多糖进一步分离纯化,主要得到五个多糖组分MCS、MHS、SCS、SHlS和SH2S。通过化学方法对理化性质进行测定,结果表明MCS、MHS、SCS、SHlS和SH2S的总糖含量分别为51.7%、52.8%、45.7%、50.4%和47.6%;糖醛酸含量为20.7%、17.2%、16.8%、19.4%和15.3%;硫酸基含量为16.9%、17.

3、5%、14.3%、10.5%和13.O%;蛋白含量均低于4%。高效凝胶渗透色谱法分析表明,MCS、MHS、SCS、SHlS和SH2S的分子量分别为412.71(Da、535.0kDa、136.2l(Da、502.1l(Da和213.5l(Da。气相色谱法和PMP柱前衍生高效液相色谱法分析表明,MCS和MHS主要由鼠李糖组成,含有少量木糖和葡萄糖醛酸;SCS、SHlS和SH2S主要由鼠李糖组成,含有少量木糖、葡萄糖醛酸和半乳糖。红外光谱法、甲基化及核磁共振波谱法分析表明,MCS和MHS主要由【叫№?Ir鼬叭1叫、H,4№J胁叭1叫、卜4>凹-_Xy妖1叫和m脚cL玲以

4、1叫组成,含有少量卜3№-I壤h叭1叫、协.I虑h州1叫,硫酸基主要位于m.I球h叭1叫的C一3位;SCS主要由卜3一J广Rh砜1一]、[川№L勋叭1叫、【叫呻-DLX)帜1叫、卜砷“广Rh叭1叫和[咄啦“鼬矾1叫组成,硫酸基位于[-,3)-mI虑h妒<1叫的C一2位或C-4位、卜2№-I虑h州1叫的C一3位或者C一4位以及m—I广Rb叭1叫的C一2位;SHlS主要由m.I虑h砜1叫、卜3知枷b叭1叫、卜2,帅d鼬州1叫、卜眵p_D-X)帜1叫和卜令pDGlcU州1叫组成,硫酸基位于卜啪【-I虑h州1叫的C.3位;SH2S主要由md,删1叫和【叫)-凹酬1叫组成,含

5、有少量M如c-L-Rh叭1一]、卜3№山酬1叫、[_,3,4№LRh妒_(1—吖、卜,2,3№LR蝎双1_】和[_寸2;咿伽I虑h叭1_],硫酸基主要位于卜÷4知-I求岫烈1叫的C一3位。2.青岛绿潮浒苔(砌据阳聊。印办口p阳,咖r口)藻体粉末经冷水和热水提取法得到两种多糖Qc和QH,得率分别为10.6%和22.6%。采用离子交换色谱法和凝聚渗透色谱法对粗多糖进一步分离纯化,主要得到四个多糖组分QClS、QCQ2、QCQ3和QHS。分析表明QClS、QCQ2、QCQ3和QHS的总糖含量分别为52.2%、42.4%、51.0%和55.6%;糖醛酸含量为10.9%、4.

6、3%、15.3%和17.3%;硫酸基含量为17.5%、13.2%、20.4%和17.4%;蛋白含量为2.1%、13.6%、2.4%和1.0%。高效凝胶渗透色谱法分析表明,QClS、QCQ2、QCQ3和QHS的分子量分别为116.3kDa、546.7kDa、541.0kDa和538.4kDa。气相色谱法和PMP柱前衍生高效液相色谱法分析表明,QClS、QCQ2、QCQ3和QHS主要由鼠李糖组成,其次为木糖;QC1S、QCQ3和QHS中还含有少量葡萄糖醛酸,而QcQ2含有少量甘露糖和氨基葡萄糖。红外光谱法、甲基化和核磁共振波谱法分析表明,QClS主要由卜固心H蚓1叫和卜

7、柳母D酬1叫组成,含有少量【-,舶J球h研蹦1叫、卜3№㈣_(1叫、卜岫L砌啦S-(1叫和卜3胁I肫叭1叫;QHS主要由[—今胡』m叭1叫、卜渤廿D醐1叫和[-嘞岬cUj坝1叫组成,含有少量卜3№-L蚓1叫和H,4)廿¨地烈1叫,硫酸基位于卜岫-I承h双1叫的C.3位,其主要含有两种二糖结构单元:卜柳母DacUA烈l山d球h卿蹦1叫和卜锄肛队冷蚁1_4M球l】郡文1叫。3.厦门沿海条浒苔(勘纪加mo伊砌c肠砌r口幻)藻体粉末经冷水和热水提取得到两种多糖XC和xH,得率分别为7.3%和10.3%。利用离子交换色谱和凝胶渗透色谱对粗多糖分离纯化,主要得到三个多糖组分

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