活血通络汤对人脐静脉内皮细胞缺氧-复氧损伤cd54表达及中性粒细胞粘附率的影响论文

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1、活血通络汤对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤CD54表达及中性粒细胞粘附率的影响论文.freelorphonuclearadhesionduringhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)anoxia/reoxygenationinjury,.freelechanisms.MethodsRabbitsserumcontainingHuoxuetongluoDecoctionodelofHUVEC.Themodelcellsalcontrol,modelgroupandgroupofhigh,medium,l

2、oorphologicchangeofcellsicroscope,theexpressionofCD54andthepolymorphonuclearadhesionined.ResultsThegroupofloediumandhighdoseofHuoxuetongluoDecoctioninhibitedtheexpressionofCD54anddecreasedtheadhesionbetorphonuclearandHUVEC,theeffectsedium,highdoseofHuoxuetongluoDecoctionandmo

3、delgrouphadstatisticalsignificance(P0.05).ConclusionHuoxuetongluoDecoctioncancontroltheexpressionofCD54,decreasetheadhesionofvascularendothelialcell(VEC)underthecircumstanceofanoxia,consequently,thedecoctioncanprotectVECfromthedamage.Thesemaybeoneofthemechanismsthatthedecocti

4、onhaseffectinthetreatmentofdeepvenousthrombosisofloity.Keyorphonuclear;adhesion人工髋关节置换术后下肢深静脉血栓形成的防治已倍受人们关注,文献报道显示,未行任何预防措施的髋关节置换术后下肢深静脉血栓发生率约50%,而肺栓塞发生率为2%~3%,后者是髋关节置换患者中术后早期死亡的原因之一1-2。因而,探讨其预防及治疗有着重要意义。血管内皮细胞(vascularendothelialcell,VEC)不仅是血流和血管壁之间的机械屏障,而且是高度活化的、功能异常活跃的内分泌、

5、旁分泌及代谢器官,多种理化因素可导致内皮细胞功能障碍,成为血管性疾病产生的关键环节3。因此,保护VEC免受有害因素的损伤,维护其正常功能,对防治下肢深静脉血栓具有重要的意义。笔者以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,观察活血通络汤对HUVEC缺氧/复氧损伤CD54表达及中性粒细胞(PMN)粘附率的影响,旨在阐明活血通络汤在临床治疗血管相关疾病的实验基础及初步机制,为防治下肢深静脉血栓提供理论依据。1实验材料1.1药物及试剂活血通络汤(薏苡仁20g,苍白术、茯苓、泽兰、泽泻、牡丹皮、丹参各10g,牛膝、鸡血藤各15g,地龙6g,蜈蚣3g,淫羊

6、藿、骨碎补、鹿含草各15g,传统水煎、冷藏保存,备用),由江苏省中医院骨伤科提供;RPMIMedium1640(美国Gibco公司);新生牛血清(兰州民海生物工程有限公司,批号070915);胰蛋白酶(1∶250,Amresco分装);RabbitAntiCD54(ICAM-1,武汉博士德生物工程有限公司);SABC免疫组化染色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);Percoll(南京生兴生物有限公司)。1.2仪器莱卡显微镜工作站(德国莱卡公司);Forma细胞培养箱(Forma公司);全自动高压灭

7、菌锅(日本SANYO公司);超净工作台(苏州净化设备厂);Beckman冷冻台式离心机(美国Beckman公司);精密移液器(吉尔森公司)。1.3动物大耳白家兔8只,雌雄各半,体重2.0~2.5kg,南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供,动物合格证号:SCXK(苏)2007-0008。1.4实验细胞人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。2实验方法2.1脐静脉内皮细胞复苏和培养冻存的HUVEC细胞37℃温水中解冻,吸出细胞悬液置于离心管中,加入含10%新生牛血清的RPMI1640培养液,1000r/min离心10min,弃去上清液,RPMI1640培养液重新

8、悬浮细胞,倒置显微镜下计数,将HUVEC按1×104cell/mL的密度接种于预先铺有玻片(5mm×5mm)、直径为35mm的培养皿中,

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