紧密连接蛋白occludin和zo1在豚鼠耳蜗外侧壁血管纹中的表达论文

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1、紧密连接蛋白occludin和ZO1在豚鼠耳蜗外侧壁血管纹中的表达论文【摘要】目的：研究紧密连接蛋白occludin，ZO1在豚鼠耳蜗外侧壁血管纹中的表达.方法：成年健康杂色豚鼠，耳廓反射灵敏，分别取耳蜗、脑、肺三组组织，免疫组织化学法及ini,EDTAfree药片（RocheDiagnostics，德国），冰上充分匀浆，12000g，4℃，离心5min，收集上清.考马斯亮蓝检测三组蛋白的含量.按照每泳道5μg加载于SDSPAGE凝胶电泳孔中，以恒压120V/40mA电泳至溴酚蓝到达凝胶底

2、边.恒流300mA转印于NC膜上.丽春红染色，TBST缓冲液配置的50g/L脱脂奶粉室温下封闭2h.三组分别加入兔抗豚鼠ZO1一抗（1μg/mL），兔抗豚鼠occludin一抗（2mg/L,ZymedLaboratories，美国）及兔抗actin（SantaCruz,.freelin，TBS缓冲液洗膜1次，10min，加入HRP标记的二抗（北京中衫,1∶5000）,37℃孵育1h，洗膜3次，每次10min.ECL化学发光系统（pierce）检测occludin，ZO1及βactin的蛋白表

3、达水平.分析阳性条带的分子量大小，用TANON高清晰度计算机图像分析系统进行灰度扫描分析，根据信号的强弱分析蛋白的表达量.以目的条带与βactin内参条带灰度的比值代表蛋白质表达水平.统计学处理：数据均用x±s表示，采用SPSS13.0统计软件，应用Oneeabilitybarriersofinnerear.Finestructureandfunction［J］．FortschrMed，1980,98(9)：330-336．［2］FuruseM，FujitaK，HiiragiT，etal.Cl

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